HEK293-VEGF-TM

Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente 6 250 €.
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As células HEK293-VEGF-TM são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas para expressar de forma estável uma forma ligada à membrana do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), geralmente concebidas para apresentar o VEGF na superfície celular através da fusão com um domínio transmembranar. Ao contrário das isoformas solúveis do VEGF que são secretadas para o ambiente extracelular, as construções VEGF-TM permitem a apresentação localizada e sustentada de ligantes do VEGF na membrana plasmática, facilitando a investigação controlada das interações do recetor do VEGF e dos mecanismos de sinalização célula-célula. Estes modelos modificados são úteis para estudar vias de sinalização angiogénicas mediadas principalmente através do VEGFR1 (FLT1) e do VEGFR2 (KDR), que regulam a proliferação endotelial, a migração, a permeabilidade vascular e a neovascularização.

As células HEK293-VEGF-TM são amplamente utilizadas na investigação da angiogénese e no desenvolvimento terapêutico para a caracterização de anticorpos direcionados ao VEGF, armadilhas de recetores, produtos biológicos antiangiogénicos e terapias com células imunitárias modificadas. A apresentação do VEGF ancorado na membrana permite a avaliação quantitativa da ligação ao recetor, da acessibilidade do ligando, do bloqueio por anticorpos, do agrupamento de recetores e de eventos de sinalização dependentes do contacto celular. Estas células são particularmente valiosas em ensaios de ligação baseados em citometria de fluxo, sistemas de cocultura, ensaios com marcadores e plataformas de triagem de alto rendimento que avaliam a inibição da via VEGF/VEGFR. Além disso, os modelos HEK293-VEGF-TM podem apoiar estudos que examinam a formação de sinapses e o reconhecimento de alvos por células CAR-T direcionadas para o VEGF ou plataformas de anticorpos bispecíficos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

Após a descongelação, dividir as células numa proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e permitir que as células recuperem do processo de congelação e adiram durante pelo menos 24 horas.

Para uma melhor fixação e viabilidade após a descongelação das células, recomendamos a utilização de frascos ou placas revestidos com colagénio para a sementeira inicial após a recuperação criogénica. O revestimento de colagénio não é necessário para a cultura de rotina subsequente das células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia