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HEK293-VEGF-TM
ティッシュ
胎児腎臓
病気
形質転換/不死化;非腫瘍形成性(HEK293系)

HEK293-VEGF-TM

Cell line · 製品番号 305991

免責事項:細胞株の表示価格は、学術機関および非営利団体のお客様のみを対象としています。営利団体のお客様については、価格は...

€1,600.00税・送料別

カスタマイズ/おすすめ

受注生産
1

01概要

説明

免責事項:細胞株の表示価格は、学術機関および非営利団体のお客様のみを対象としています。営利団体のお客様の場合、価格は約6,250ユーロとなります。
営利団体に所属されている場合、またはどちらのカテゴリーに該当するかご不明な場合は、 弊社までお問い合わせください。


HEK293-VEGF-TM細胞は、ヒト胎児腎臓293(HEK293)細胞を改変し、膜結合型血管内皮増殖因子(VEGF)を安定的に発現するように設計されたものです。これは一般的に、膜貫通ドメインとの融合により、細胞表面でVEGFを提示するように設計されています。 細胞外環境に分泌される可溶性VEGFアイソフォームとは異なり、VEGF-TM構築体は、細胞膜上でのVEGFリガンドの局所的かつ持続的な提示を可能にし、VEGF受容体との相互作用や細胞間シグナル伝達メカニズムの制御された解析を促進します。これらの改変モデルは、主にVEGFR1(FLT1)およびVEGFR2(KDR)を介して媒介される血管新生シグナル伝達経路の研究に有用であり、これらは内皮細胞の増殖、遊走、血管透過性、および新生血管形成を調節します。

HEK293-VEGF-TM細胞は、血管新生研究や治療法開発において、VEGF標的抗体、受容体トラップ、抗血管新生生物製剤、および遺伝子改変免疫細胞療法の特性評価に広く利用されている。膜結合型VEGFの発現により、受容体結合、リガンドへのアクセス性、抗体による遮断、受容体のクラスタリング、および細胞間接触依存性シグナル伝達イベントの定量的評価が可能となる。 これらの細胞は、フローサイトメトリーを用いた結合アッセイ、共培養システム、レポーターアッセイ、およびVEGF/VEGFR経路の阻害を評価するハイスループットスクリーニングプラットフォームにおいて特に有用です。さらに、HEK293-VEGF-TMモデルは、VEGFを標的とするCAR-T細胞や二重特異性抗体プラットフォームによるシナプス形成や標的認識を調べる研究を支援することができます。

ティッシュ
胎児腎臓
病気
形質転換/不死化;非腫瘍形成性(HEK293系)
用途
膜貫通型VEGF(VEGF-TM)の研究;抗VEGF抗体の開発;腫瘍血管新生に関する研究;ADCC/CDCアッセイ;フローサイトメトリー;腫瘍学および眼科学の研究

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
上皮細胞
倍増時間
約24~36時間

04識別子

引用
HEK293-VEGF-TM(Cytion カタログ番号 305991)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6G30

05発現と感受性

発現している受容体
VEGF-TM

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、1mM ピルビン酸ナトリウム、10mM HEPES、1% NEAAを添加する。最終濃度が1 mg/mLになるようにGeneticin(G418-Sulfat)を加える。
解離試薬
トリプシン-EDTA
継代培養
通常の接着細胞培養の場合:付着細胞から古い培地を吸引し、PBSで洗浄して残存培地を除去する。PBSを吸引した後、培養容器のサイズに応じて適切な量のTrypsin/EDTA溶液を加え(例えば、T25フラスコなら1ml、T75フラスコなら3ml)、細胞が剥離するまで(5~10分)室温または37℃でインキュベートする。顕微鏡で剥離を観察し、必要に応じて容器を軽くたたいて細胞を離す。いったん剥離したら、完全培地を加えてTrypsin/EDTAを失活させ、細胞を静かに再懸濁し、細胞懸濁液のアリコートを新しい培地の入った新しい培養容器に移す。容器を37℃、5%CO2に設定したインキュベーターに入れ、2~3日ごとに培地を交換する。
分割比率
1~5
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復

解凍後、T25フラスコに1:2~1:3の割合で細胞を分割し、凍結か ら細胞を回復させ、少なくとも24時間接着させる。

解凍後の細胞の接着と生存率を最良にするため、凍結回復後の最初の播種にはコラーゲンコートしたフラスコまたはプレートを使用することを推奨します。その後の細胞のルーチン培養には、コラーゲンコーティングは必要ありません。

解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児