
- Szövet
- Magzati vese
- Betegség
- Átalakított/halhatatlanná tett; nem tumorigenikus (HEK293 háttér)
Dokumentumok
HEK293-VEGF-TM
Cell line · Termékszám 305991
Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az árak...
Személyre szabás / Ajánlások
- HEK293-VEGF-TMCell line€1,600.00
01Általános információk
- Leírás
Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az ár körülbelül 6 250 euró.
Amennyiben kereskedelmi szervezetet képvisel, vagy nem biztos abban, hogy melyik kategória vonatkozik Önre, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot.
A HEK293-VEGF-TM sejtek olyan humán embrionális vese 293 (HEK293) sejtek, amelyeket úgy alakítottak ki, hogy stabilan expresszálják a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF) membránhoz kötött formáját, amelyet általában úgy terveztek, hogy a transzmembrán doménnel való fúzión keresztül a VEGF-et a sejtfelszínen mutassa be. Az extracelluláris környezetbe kiválasztott oldható VEGF-izoformáktól eltérően a VEGF-TM konstrukciók lehetővé teszik a VEGF-ligandok lokalizált és tartós megjelenítését a plazmamembránon, megkönnyítve a VEGF-receptor-interakciók és a sejt-sejt jelátviteli mechanizmusok szabályozott vizsgálatát. Ezek a génmódosított modellek hasznosak elsősorban a VEGFR1 (FLT1) és a VEGFR2 (KDR) által közvetített angiogén jelátviteli útvonalak tanulmányozásához, amelyek szabályozzák az endoteliális proliferációt, migrációt, a vaszkuláris permeabilitást és a neovaszkularizációt.
A HEK293-VEGF-TM sejteket széles körben használják az angiogenezis kutatásában és a terápiás fejlesztésben a VEGF-célzott antitestek, a receptorcsapdák, az antiangiogén biológiai szerek és a módosított immunsejt-terápiák jellemzésére. A membránhoz rögzített VEGF-prezentáció lehetővé teszi a receptor-kötődés, a ligand hozzáférhetőség, az antitest-blokád, a receptor-klasztereződés és a sejt-kontaktus-függő jelátviteli események kvantitatív értékelését. Ezek a sejtek különösen értékesek az áramlási citometrián alapuló kötődési vizsgálatokban, ko-kultúra rendszerekben, riporter vizsgálatokban és a VEGF/VEGFR útvonal gátlását értékelő nagy áteresztőképességű szűrőplatformokban. Ezen felül a HEK293-VEGF-TM modellek támogathatják a szinapszis kialakulását és a célfelismerést vizsgáló kutatásokat VEGF-irányított CAR-T sejtek vagy bispecifikus antitest platformok segítségével.
- Szövet
- Magzati vese
- Betegség
- Átalakított/halhatatlanná tett; nem tumorigenikus (HEK293 háttér)
- Alkalmazások
- A transzmembrán VEGF (VEGF-TM) kutatása; anti-VEGF antitestek fejlesztése; tumoros angiogenezis vizsgálatok; ADCC/CDC-vizsgálatok; áramlási citometria; onkológiai és szemészeti kutatások
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Sejttípus
- Epithel sejtek
- Kettőzési idő
- kb. 24–36 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- HEK293-VEGF-TM (Cytion katalógusszám: 305991)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G30
05Kifejeződés és fogékonyság
- Kifejeződő receptorok
- VEGF-TM
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 1 mM nátrium-piruváttal, 10 mM HEPES-szel, 1% NEAA-val. Adjunk hozzá Geneticint (G418-Sulfat), hogy a végső koncentráció 1 mg/ml legyen.
- Diszociációs reagens
- Trypsin-EDTA
- Átültetés
- Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombikhoz, 3 ml T75 lombikhoz), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on, amíg a sejtek leválnak (5-10 perc). Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. Ha a sejtek leváltak, adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
- Osztási arány
- 1–5
- Ültetési sűrűség
- 2–4 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után osszuk a sejteket 1:2-1:3 arányban T25 lombikokba, és hagyjuk, hogy a sejtek legalább 24 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból és megtapadjanak.
A sejtek felolvasztása után a legjobb kötődés és életképesség érdekében javasoljuk, hogy a mélyhűtés utáni első beültetéshez kollagénnel bevont lombikokat vagy lemezeket használjunk. A sejtek későbbi rutinszerű tenyésztéséhez nincs szükség kollagénbevonatra.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- Magzat
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen






.jpg)
