
- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Dokumenter
HEK293-VEGF-TM
Cell line · Varenummer 305991
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...
Tilpasning / Anbefalinger
- HEK293-VEGF-TMCell line€1,600.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser for cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.
HEK293-VEGF-TM-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), der er konstrueret til stabilt at udtrykke en membranbundet form af vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF), som typisk er designet til at præsentere VEGF på celleoverfladen gennem fusion med et transmembrant domæne. I modsætning til opløselige VEGF-isoformer, der udskilles til det ekstracellulære miljø, muliggør VEGF-TM-konstruktioner lokaliseret og vedvarende præsentation af VEGF-ligander på plasmamembranen, hvilket letter kontrolleret undersøgelse af VEGF-receptorinteraktioner og celle-til-celle-signalmekanismer. Disse konstruerede modeller er nyttige til at studere angiogene signalveje, der primært formidles gennem VEGFR1 (FLT1) og VEGFR2 (KDR), som regulerer endotelproliferation, migration, vaskulær permeabilitet og neovaskularisering.
HEK293-VEGF-TM-celler anvendes i vid udstrækning i angiogeneseforskning og terapeutisk udvikling til karakterisering af VEGF-målrettede antistoffer, receptorfælder, antiangiogene biologiske lægemidler og konstruerede immuncelleterapier. Den membranforankrede VEGF-præsentation muliggør kvantitativ vurdering af receptorbinding, ligandtilgængelighed, antistofblokade, receptorclustering og cellekontakt-afhængige signalbegivenheder. Disse celler er særligt værdifulde i flowcytometri-baserede bindingsassays, co-kultursystemer, reporterassays og højkapacitets-screeningsplatforme, der evaluerer hæmning af VEGF/VEGFR-signalvejen. Derudover kan HEK293-VEGF-TM-modeller understøtte studier, der undersøger synapsedannelse og målgenkendelse ved VEGF-rettede CAR-T-celler eller bispecifikke antistofplatforme.
- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
- Anvendelser
- Forskning i transmembran-VEGF (VEGF-TM); udvikling af anti-VEGF-antistoffer; undersøgelser af tumorangiogenese; ADCC/CDC-analyser; flowcytometri; forskning inden for onkologi og oftalmologi
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
- Fordoblingstid
- ca. 24–36 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HEK293-VEGF-TM (Cytion-varenummer 305991)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G30
05Udtryk og modtagelighed
- Udtrykte receptorer
- VEGF-TM
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 1 mg/mL.
- Dissociationsreagens
- Trypsin-EDTA
- Oddyrkning
- Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
- Opdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtæthed
- 2 til 4 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
Efter optøning opdeles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og hæfte i mindst 24 timer.
For at opnå den bedste vedhæftning og levedygtighed efter optøning af cellerne anbefaler vi at bruge kollagencoatede kolber eller plader til den første udsåning efter kryogendannelse. Kollagenbelægning er ikke nødvendig til efterfølgende rutinemæssig dyrkning af cellerne.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Foster
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja






.jpg)
