Gå direkte til indholdet
HEK293-VEGF-TM
Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)

Dokumenter

HEK293-VEGF-TM

Cell line · Varenummer 305991

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...

€1,600.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser for cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.


HEK293-VEGF-TM-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), der er konstrueret til stabilt at udtrykke en membranbundet form af vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF), som typisk er designet til at præsentere VEGF på celleoverfladen gennem fusion med et transmembrant domæne. I modsætning til opløselige VEGF-isoformer, der udskilles til det ekstracellulære miljø, muliggør VEGF-TM-konstruktioner lokaliseret og vedvarende præsentation af VEGF-ligander på plasmamembranen, hvilket letter kontrolleret undersøgelse af VEGF-receptorinteraktioner og celle-til-celle-signalmekanismer. Disse konstruerede modeller er nyttige til at studere angiogene signalveje, der primært formidles gennem VEGFR1 (FLT1) og VEGFR2 (KDR), som regulerer endotelproliferation, migration, vaskulær permeabilitet og neovaskularisering.

HEK293-VEGF-TM-celler anvendes i vid udstrækning i angiogeneseforskning og terapeutisk udvikling til karakterisering af VEGF-målrettede antistoffer, receptorfælder, antiangiogene biologiske lægemidler og konstruerede immuncelleterapier. Den membranforankrede VEGF-præsentation muliggør kvantitativ vurdering af receptorbinding, ligandtilgængelighed, antistofblokade, receptorclustering og cellekontakt-afhængige signalbegivenheder. Disse celler er særligt værdifulde i flowcytometri-baserede bindingsassays, co-kultursystemer, reporterassays og højkapacitets-screeningsplatforme, der evaluerer hæmning af VEGF/VEGFR-signalvejen. Derudover kan HEK293-VEGF-TM-modeller understøtte studier, der undersøger synapsedannelse og målgenkendelse ved VEGF-rettede CAR-T-celler eller bispecifikke antistofplatforme.

Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Anvendelser
Forskning i transmembran-VEGF (VEGF-TM); udvikling af anti-VEGF-antistoffer; undersøgelser af tumorangiogenese; ADCC/CDC-analyser; flowcytometri; forskning inden for onkologi og oftalmologi

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24–36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-VEGF-TM (Cytion-varenummer 305991)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6G30

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
VEGF-TM

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 1 mg/mL.
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Efter optøning opdeles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og hæfte i mindst 24 timer.

For at opnå den bedste vedhæftning og levedygtighed efter optøning af cellerne anbefaler vi at bruge kollagencoatede kolber eller plader til den første udsåning efter kryogendannelse. Kollagenbelægning er ikke nødvendig til efterfølgende rutinemæssig dyrkning af cellerne.

Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster