HEK293-VEGF-TM

Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d'environ 6 250 €.
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Les cellules HEK293-VEGF-TM sont des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) modifiées pour exprimer de manière stable une forme membranaire du facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF), généralement conçues pour présenter le VEGF à la surface cellulaire par fusion avec un domaine transmembranaire. Contrairement aux isoformes solubles du VEGF qui sont sécrétées dans l'environnement extracellulaire, les constructions VEGF-TM permettent une présentation localisée et soutenue des ligands du VEGF sur la membrane plasmique, facilitant ainsi l'étude contrôlée des interactions avec les récepteurs du VEGF et des mécanismes de signalisation intercellulaire. Ces modèles modifiés sont utiles pour étudier les voies de signalisation angiogéniques médiées principalement par le VEGFR1 (FLT1) et le VEGFR2 (KDR), qui régulent la prolifération endothéliale, la migration, la perméabilité vasculaire et la néovascularisation.

Les cellules HEK293-VEGF-TM sont largement utilisées dans la recherche sur l'angiogenèse et le développement thérapeutique pour la caractérisation d'anticorps ciblant le VEGF, de pièges à récepteurs, de produits biologiques anti-angiogéniques et de thérapies à base de cellules immunitaires modifiées. La présentation du VEGF ancrée à la membrane permet une évaluation quantitative de la liaison au récepteur, de l'accessibilité du ligand, du blocage par les anticorps, de l'agrégation des récepteurs et des événements de signalisation dépendants du contact cellulaire. Ces cellules sont particulièrement utiles dans les tests de liaison par cytométrie en flux, les systèmes de co-culture, les tests de reporter et les plateformes de criblage à haut débit évaluant l'inhibition de la voie VEGF/VEGFR. De plus, les modèles HEK293-VEGF-TM peuvent servir de support à des études examinant la formation de synapses et la reconnaissance de cibles par des cellules CAR-T dirigées contre le VEGF ou des plateformes d'anticorps bispécifiques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

Après décongélation, diviser les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.

Pour un meilleur attachement et une meilleure viabilité après la décongélation des cellules, nous recommandons d'utiliser des flacons ou des plaques recouverts de collagène pour l'ensemencement initial après la cryo-récupération. L'enrobage de collagène n'est pas nécessaire pour la culture de routine ultérieure des cellules.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie