İçeriğe atla
HEK293-VEGF-TM
Doku
Fetal Böbrek
Hastalık
Dönüştürülmüş/ölümsüzleştirilmiş; tümör oluşturmayan (HEK293 arka planı)

HEK293-VEGF-TM

Cell line · Ürün numarası 305991

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyatlar...

€1,600.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyat yaklaşık 6.250 €'dur.
Ticari bir kuruluşu temsil ediyorsanız veya hangi kategoriye girdiğinizden emin değilseniz, lütfen bizimle iletişime geçin.


HEK293-VEGF-TM hücreleri, vasküler endotelyal büyüme faktörünün (VEGF) membran bağlı bir formunu stabil bir şekilde eksprese etmek üzere tasarlanmış insan embriyonik böbrek 293 (HEK293) hücreleridir; bu hücreler genellikle bir transmembran alanı ile füzyon yoluyla hücre yüzeyinde VEGF'yi sunmak üzere tasarlanmıştır. Hücre dışı ortama salgılanan çözünür VEGF izoformlarından farklı olarak, VEGF-TM yapıları, VEGF ligandlarının plazma zarı üzerinde lokalize ve sürdürülebilir bir şekilde sunulmasını sağlar; bu da VEGF reseptör etkileşimlerinin ve hücre-hücre sinyal mekanizmalarının kontrollü bir şekilde araştırılmasını kolaylaştırır. Bu mühendislik modelleri, endotel proliferasyonunu, göçünü, vasküler geçirgenliği ve neovaskülarizasyonu düzenleyen, esas olarak VEGFR1 (FLT1) ve VEGFR2 (KDR) aracılığıyla aracılık edilen anjiyojenik sinyal yolaklarının incelenmesinde yararlıdır.

HEK293-VEGF-TM hücreleri, VEGF hedefli antikorların, reseptör tuzaklarının, anti-anjiyojenik biyolojik ajanların ve mühendislik ürünü immün hücre tedavilerinin karakterizasyonu için anjiyogenez araştırmalarında ve terapötik geliştirmede yaygın olarak kullanılmaktadır. Membrana bağlı VEGF sunumu, reseptör bağlanmasının, ligand erişilebilirliğinin, antikor blokajının, reseptör kümelenmesinin ve hücre teması bağımlı sinyal olaylarının kantitatif değerlendirmesini mümkün kılar. Bu hücreler, akış sitometrisi tabanlı bağlanma testleri, ortak kültür sistemleri, raportör testleri ve VEGF/VEGFR yolak inhibisyonunu değerlendiren yüksek verimli tarama platformlarında özellikle değerlidir. Ayrıca, HEK293-VEGF-TM modelleri, VEGF yönlendirmeli CAR-T hücreleri veya bispesifik antikor platformları tarafından sinaps oluşumu ve hedef tanıma süreçlerini inceleyen çalışmaları destekleyebilir.

Doku
Fetal Böbrek
Hastalık
Dönüştürülmüş/ölümsüzleştirilmiş; tümör oluşturmayan (HEK293 arka planı)
Uygulamalar
Transmembran VEGF (VEGF-TM) araştırmaları; anti-VEGF antikoru geliştirme; tümör anjiyogenezi çalışmaları; ADCC/CDC testleri; akış sitometrisi; onkoloji ve oftalmoloji araştırmaları

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24-36 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HEK293-VEGF-TM (Cytion katalog numarası 305991)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6G30

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
VEGF-TM

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 1 mM sodyum piruvat, 10 mM HEPES, %1 NEAA ile takviye edin. Nihai 1 mg/mL konsantrasyon elde etmek için Geneticin (G418-Sulfat) ekleyin.
Ayrıştırma reaktifi
Tripsin-EDTA
Alt kültür oluşturma
Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve hücreler ayrılana kadar (5-10 dakika) oda sıcaklığında veya 37°C'de inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 ila 4 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma

Çözüldükten sonra, hücreleri T25 flasklara 1:2 ila 1:3 oranında bölün ve hücrelerin donma işleminden kurtulmasına ve en az 24 saat boyunca yapışmasına izin verin.

Hücreler çözüldükten sonra en iyi tutunma ve canlılık için, kriyo-iyileşmeden sonra ilk ekim için Kolajen kaplı flasklar veya plakalar kullanmanızı öneririz. Hücrelerin sonraki rutin kültürü için kolajen kaplama gerekli değildir.

Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs