HEK293-VEGF-TM

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Las células HEK293-VEGF-TM son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de forma estable una forma de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) unida a la membrana, diseñada habitualmente para presentar el VEGF en la superficie celular mediante la fusión con un dominio transmembranario. A diferencia de las isoformas solubles de VEGF que se secretan al entorno extracelular, los constructos VEGF-TM permiten la presentación localizada y sostenida de ligandos de VEGF en la membrana plasmática, lo que facilita la investigación controlada de las interacciones de los receptores de VEGF y los mecanismos de señalización célula-célula. Estos modelos modificados son útiles para estudiar las vías de señalización angiogénicas mediadas principalmente a través de VEGFR1 (FLT1) y VEGFR2 (KDR), que regulan la proliferación endotelial, la migración, la permeabilidad vascular y la neovascularización.

Las células HEK293-VEGF-TM se utilizan ampliamente en la investigación de la angiogénesis y el desarrollo terapéutico para la caracterización de anticuerpos dirigidos contra el VEGF, trampas de receptores, productos biológicos antiangiogénicos y terapias con células inmunitarias modificadas. La presentación del VEGF anclado a la membrana permite la evaluación cuantitativa de la unión al receptor, la accesibilidad del ligando, el bloqueo por anticuerpos, la agrupación de receptores y los eventos de señalización dependientes del contacto celular. Estas células son especialmente valiosas en ensayos de unión basados en citometría de flujo, sistemas de cocultivo, ensayos con marcadores y plataformas de cribado de alto rendimiento que evalúan la inhibición de la vía del VEGF/VEGFR. Además, los modelos HEK293-VEGF-TM pueden servir de base para estudios que examinen la formación de sinapsis y el reconocimiento de dianas por parte de células CAR-T dirigidas contra el VEGF o plataformas de anticuerpos biespecíficos.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

Tras la descongelación, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.

Para una mejor adhesión y viabilidad tras la descongelación de las células, recomendamos utilizar matraces o placas recubiertos de colágeno para la siembra inicial tras la criorrecuperación. El recubrimiento de colágeno no es necesario para el posterior cultivo rutinario de las células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía