CRFK

CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) ląstelių linija yra gerai žinomas modelis, gautas iš normalaus kačių embriono inkstų žievės. Ji plačiai naudojama virusologijos tyrimuose, ypač kačių virusų, pvz., kačių infekcinio peritonito viruso (FIPV) ir kačių herpesviruso (FHV-1), tyrimams. CRFK ląstelės yra labai imlios įvairiems kačių virusams, todėl jos yra nepakeičiamos kuriant vakcinas ir atliekant virusologinius tyrimus. Pavyzdžiui, šios ląstelės naudojamos gyvų susilpnintų vakcinų, pvz., FVRCP vakcinų, apsaugančių nuo kačių rinotracheito, kaliciviruso ir panleukopenijos, gamybai ir bandymams. Šios ląstelių linijos vaidmuo virusų replikacijos tyrimuose leido gauti svarbių įžvalgų apie šeimininko ir viruso sąveiką bei viruso sukeliamus citopatinius efektus, pavyzdžiui, sincitijų susidarymą ir ląstelių morfologijos pokyčius.

Naujausi tyrimai atkreipė dėmesį į iššūkius, susijusius su CRFK ląstelių naudojimu vakcinų kūrimui dėl endogeninių retrovirusų (ERV) keliamos užteršimo rizikos. Konkrečiai, CRFK ląstelės per rekombinacijos procesus gali gaminti užkrečiamą RD-114 virusą – kačių endogeninį retrovirusą. Siekiant išspręsti šias saugos problemas, buvo panaudotos genomo redagavimo technologijos, pavyzdžiui, TALEN, siekiant išjungti RD-114 susijusių sekų env genus, taip sumažinant ERV užteršimo riziką vakcinos gamybos procese. Šios modifikacijos nekenkia CRFK ląstelių gyvybingumui, o modifikuotos RDKO_CRFK ląstelės pasižymi geresniais saugumo rodikliais, todėl jas galima naudoti biologinių preparatų gamyboje.

Be to, CRFK ląstelių transkriptomikos analizės parodė, kad reaguodamos į virusines infekcijas jos pasižymi skirtingais genų ekspresijos profiliais. Užsikrėtus FIPV, CRFK ląstelės suaktyvina įvairius su imunine sistema susijusius signalinius kelius, įskaitant Toll tipo receptorių signalizaciją, MAPK ir JAK-STAT signalinius kelius, tuo pačiu žymiai slopindamos signalinius kelius, susijusius su neuronų ir ląstelių organizavimusi. Šie ekspresijos pokyčiai atspindi įgimtą imuninį atsaką, aktyvuojamą epitelio ląstelėse, ir išryškina skirtumus, palyginti su pirminėmis imuninėmis ląstelėmis, pavyzdžiui, makrofagais, kurie panašiomis sąlygomis rodo skirtingą šeimininko atsaką. Tokie rezultatai pabrėžia CRFK ląstelių naudą modeliuojant ankstyvųjų stadijų šeimininko ir patogeno sąveikas bei vertinant antivirusines strategijas.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime