CRFK

CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) šūnu līnija ir labi izstrādāts modelis, kas iegūts no normāla kaķu embrija nieru garozas. To plaši izmanto viroloģijas pētījumos, jo īpaši kaķu vīrusu, piemēram, kaķu infekciozā peritonīta vīrusa (FIPV) un kaķu herpesvīrusa (FHV-1), izpētē. CRFK šūnas ir ļoti uzņēmīgas pret dažādiem kaķu vīrusiem, kas tās padara neaizstājamas vakcīnu izstrādē un viroloģiskajos testos. Piemēram, šīs šūnas izmanto dzīvu vājinātu vakcīnu, piemēram, FVRCP vakcīnu, ražošanā un testēšanā, kas aizsargā pret kaķu rinotraheītu, kalicivīrusu un panleikopēniju. Šīs šūnu līnijas loma vīrusu replikācijas pētījumos ir sniegusi būtiskas atziņas par saimnieka un vīrusa mijiedarbību un vīrusa izraisītiem citopātiskiem efektiem, piemēram, sincitiju veidošanos un šūnu morfoloģijas izmaiņām.

Nesenie pētījumi ir izgaismojuši problēmas, kas saistītas ar CRFK šūnu izmantošanu vakcīnu izstrādē, jo pastāv endogēno retrovīrusu (ERV) radīts piesārņojuma risks. Konkrēti, CRFK šūnas rekombinācijas procesa rezultātā var ražot infekciozo RD-114 vīrusu — kaķu endogēno retrovīrusu. Lai novērstu šīs drošības bažas, ir izmantotas genoma rediģēšanas tehnoloģijas, piemēram, TALEN, lai izslēgtu RD-114 saistīto sekvenču env gēnus, tādējādi samazinot ERV kontaminācijas risku vakcīnu ražošanā. Šīs modifikācijas neietekmē CRFK šūnu dzīvotspēju, un ģenētiski modificētās RDKO_CRFK šūnas ir parādījušas uzlabotus drošības rādītājus izmantošanai bioloģisko zāļu ražošanā.

Turklāt CRFK šūnu transkriptomiskās analīzes ir parādījušas to diferencētos gēnu ekspresijas profilus reakcijā uz vīrusu infekcijām. Inficējoties ar FIPV, CRFK šūnas pastiprina dažādu ar imūnsistēmu saistītu signālceļu darbību, tostarp Toll-līdzīgo receptoru signālceļu, MAPK un JAK-STAT ceļu darbību, vienlaikus ievērojami samazinot to ceļu aktivitāti, kas saistīti ar neironu un šūnu organizāciju. Šīs ekspresijas izmaiņas atspoguļo iedzimto imūnreakciju, kas tiek aktivizēta epitēlija šūnās, un izceļ atšķirības salīdzinājumā ar primārām imūnsistēmas šūnām, piemēram, makrofāgiem, kuriem līdzīgos apstākļos novēro atšķirīgas saimnieka reakcijas. Šādi atklājumi uzsver CRFK šūnu lietderību agrīnās stadijas saimnieka un patogēna mijiedarbības modelēšanā un pretvīrusu stratēģiju novērtēšanā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu