CRFK

Celična linija CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) je uveljavljen model, pridobljen iz ledvičnega korteksa normalnega mačjega zarodka. Široko se uporablja v viroloških raziskavah, zlasti za preučevanje mačjih virusov, kot sta virus mačjega infekcioznega peritonitisa (FIPV) in mačji herpesvirus (FHV-1). Celice CRFK so zelo dovzetne za različne mačje viruse, zaradi česar so neprecenljive za razvoj cepiv in virološke teste. Te celice se na primer uporabljajo pri proizvodnji in testiranju živih oslabljenih cepiv, kot so cepiva FVRCP, ki ščitijo pred mačjo rinotraheitisom, kalicivirusom in panleukopenijo. Vloga te celične linije v študijah virusne replikacije je prinesla ključne vpoglede v interakcije med gostiteljem in virusom ter virusno povzročene citopatske učinke, kot sta nastajanje sincij in spremembe v celični morfologiji.

Nedavne raziskave so izpostavile izzive, povezane z uporabo celic CRFK pri razvoju cepiv zaradi tveganja kontaminacije z endogenimi retrovirusi (ERV). Natančneje, celice CRFK lahko prek rekombinacijskih dogodkov proizvajajo infektivni virus RD-114, mačji endogeni retrovirus. Za rešitev teh varnostnih pomislekov so bile uporabljene tehnologije urejanja genoma, kot so TALEN-i, za izklop genov env v zaporedjih, povezanih z RD-114, s čimer se zmanjša tveganje kontaminacije z ERV pri proizvodnji cepiv. Te spremembe ne ogrožajo vitalnosti celic CRFK, genetsko spremenjene celice RDKO_CRFK pa so pokazale izboljšane varnostne profile za uporabo pri proizvodnji bioloških zdravil.

Poleg tega so transkriptomske analize celic CRFK pokazale njihove različne profile genske ekspresije v odzivu na virusne okužbe. Ob okužbi s FIPV celice CRFK povečajo aktivnost različnih imunskih poti, vključno s signalizacijo Toll-podobnih receptorjev ter potmi MAPK in JAK-STAT, hkrati pa kažejo znatno zmanjšanje aktivnosti poti, vpletenih v nevronsko in celično organizacijo. Te spremembe v izražanju odražajo prirojene imunski odzive, ki se aktivirajo v epitelnih celicah, in poudarjajo razlike v primerjavi s primarnimi imunskimi celicami, kot so makrofagi, ki v podobnih pogojih kažejo drugačne odzive gostitelja. Takšne ugotovitve poudarjajo uporabnost celic CRFK pri modeliranju interakcij med gostiteljem in patogenom v zgodnji fazi ter pri ocenjevanju protivirusnih strategij.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo