CRFK

Bunka CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) je osvedčený model odvodený z obličkovej kôry normálneho mačacieho embrya. Široko sa využíva vo virologickom výskume, najmä pri štúdiu mačacích vírusov, ako je vírus infekčnej peritonitídy mačiek (FIPV) a mačací herpesvírus (FHV-1). Bunky CRFK sú vysoko citlivé na rôzne mačacie vírusy, čo ich robí neoceniteľnými pri vývoji vakcín a virologických testoch. Tieto bunky sa napríklad používajú pri výrobe a testovaní živých oslabených vakcín, ako sú vakcíny FVRCP, ktoré chránia proti mačacej rinotracheitíde, kalicivírusu a panleukopénii. Úloha tejto bunkovej línie v štúdiách vírusovej replikácie priniesla kľúčové poznatky o interakciách medzi hostiteľom a vírusom a o vírusom indukovaných cytopatických účinkoch, ako je tvorba syncytií a zmeny v morfológii buniek.

Nedávny výskum poukázal na výzvy spojené s využívaním buniek CRFK pri vývoji vakcín v dôsledku rizika kontaminácie endogénnymi retrovírusmi (ERV). Konkrétne, bunky CRFK môžu prostredníctvom rekombinačných udalostí produkovať infekčný vírus RD-114, endogénny retrovírus mačiek. S cieľom vyriešiť tieto bezpečnostné obavy sa použili technológie úpravy genómu, ako sú TALENy, na vyradenie génov env zo sekvencií súvisiacich s RD-114, čím sa znížilo riziko kontaminácie ERV pri výrobe vakcín. Tieto modifikácie neohrozujú životaschopnosť buniek CRFK a modifikované bunky RDKO_CRFK preukázali zlepšené bezpečnostné profily pre použitie pri výrobe biologických liekov.

Okrem toho transkriptomické analýzy buniek CRFK preukázali ich odlišné profily génovej expresie v reakcii na vírusové infekcie. Po infekcii vírusom FIPV bunky CRFK zvyšujú expresiu rôznych imunitných dráh, vrátane signálnej dráhy Toll-like receptorov, MAPK a JAK-STAT, pričom zároveň vykazujú výrazné zníženie expresie dráh zapojených do neurónovej a bunkovej organizácie. Tieto zmeny v expresii odrážajú vrodené imunitné reakcie aktivované v epitelových bunkách a zdôrazňujú rozdiely v porovnaní s primárnymi imunitnými bunkami, ako sú makrofágy, ktoré vykazujú odlišné reakcie hostiteľa za podobných podmienok. Takéto zistenia podčiarkujú užitočnosť buniek CRFK pri modelovaní interakcií medzi hostiteľom a patogénom v ranom štádiu a pri hodnotení antivírusových stratégií.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke