CRFK

Клітинна лінія CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) — це добре відома модель, отримана з кори нирок нормального ембріона кота. Вона широко використовується у вірусологічних дослідженнях, зокрема для вивчення вірусів котів, таких як вірус інфекційного перитоніту котів (FIPV) та герпесвірус котів (FHV-1). Клітини CRFK є високо сприйнятливими до різних вірусів котів, що робить їх незамінними для розробки вакцин та проведення вірусологічних аналізів. Наприклад, ці клітини використовуються у виробництві та тестуванні живих атенуйованих вакцин, таких як вакцини FVRCP, що забезпечують захист від ринотрахеїту котів, каліцивірусу та панлейкопенії. Роль клітинної лінії в дослідженнях реплікації вірусів дозволила отримати важливі відомості про взаємодію «господар-вірус» та індуковані вірусом цитопатичні ефекти, такі як утворення синцитій та зміни клітинної морфології.

Нещодавні дослідження висвітлили проблеми, пов’язані з використанням клітин CRFK для розробки вакцин, що зумовлені ризиками контаминації ендогенними ретровірусами (ЕРВ). Зокрема, клітини CRFK можуть продукувати інфекційний вірус RD-114 — ендогенний ретровірус котів — у результаті рекомбінаційних процесів. Для вирішення цих проблем безпеки були застосовані технології редагування геному, такі як TALEN, для нокауту генів env у послідовностях, пов’язаних з RD-114, що знижує ризик забруднення ERV під час виробництва вакцин. Ці модифікації не погіршують життєздатність клітин CRFK, а модифіковані клітини RDKO_CRFK продемонстрували покращені показники безпеки для використання у виробництві біологічних препаратів.

Крім того, транскриптомний аналіз клітин CRFK продемонстрував їхні диференційовані профілі експресії генів у відповідь на вірусні інфекції. Після інфікування вірусом FIPV клітини CRFK активують різні імунні шляхи, зокрема сигнальні шляхи Toll-подібних рецепторів, MAPK та JAK-STAT, водночас демонструючи значне пригнічення шляхів, залучених до нейрональної та клітинної організації. Ці зміни експресії відображають вроджені імунні реакції, що активуються в епітеліальних клітинах, та підкреслюють відмінності порівняно з первинними імунними клітинами, такими як макрофаги, які демонструють відмінні реакції хазяїна за подібних умов. Такі результати підкреслюють корисність клітин CRFK для моделювання взаємодій «хазяїн-патоген» на ранніх стадіях та оцінки антивірусних стратегій.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>