CRFK

Garis sel CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) merupakan model yang telah mapan, yang berasal dari korteks ginjal embrio kucing normal. Model ini banyak digunakan dalam penelitian virologi, khususnya untuk mempelajari virus kucing seperti virus peritonitis menular kucing (FIPV) dan herpesvirus kucing (FHV-1). Sel CRFK sangat rentan terhadap berbagai virus kucing, sehingga sangat berharga untuk pengembangan vaksin dan uji virologi. Misalnya, sel-sel ini digunakan dalam produksi dan pengujian vaksin hidup yang dilemahkan, seperti vaksin FVRCP, yang memberikan perlindungan terhadap rinotrakheitis kucing, calicivirus, dan panleukopenia. Peran garis sel ini dalam studi replikasi virus telah mengungkap wawasan penting mengenai interaksi inang-virus dan efek sitopatik yang diinduksi virus, seperti pembentukan sinkitium dan perubahan morfologi seluler.

Penelitian terkini telah menyoroti tantangan yang terkait dengan penggunaan sel CRFK untuk pengembangan vaksin akibat risiko kontaminasi yang ditimbulkan oleh retrovirus endogen (ERV). Secara khusus, sel CRFK dapat menghasilkan virus RD-114 yang menular, yaitu retrovirus endogen kucing, melalui peristiwa rekombinasi. Untuk mengatasi masalah keamanan ini, teknologi pengeditan genom seperti TALEN telah digunakan untuk menonaktifkan gen env dari urutan yang terkait dengan RD-114, sehingga mengurangi risiko kontaminasi ERV dalam produksi vaksin. Modifikasi ini tidak mengganggu viabilitas sel CRFK, dan sel RDKO_CRFK yang direkayasa telah menunjukkan profil keamanan yang lebih baik untuk digunakan dalam produksi produk biologis.

Selain itu, analisis transkriptomik sel CRFK telah menunjukkan profil ekspresi gen yang berbeda sebagai respons terhadap infeksi virus. Saat terinfeksi FIPV, sel CRFK meningkatkan regulasi berbagai jalur terkait kekebalan, termasuk pensinyalan reseptor Toll-like, MAPK, dan jalur JAK-STAT, sekaligus menunjukkan penurunan regulasi yang signifikan pada jalur-jalur yang terlibat dalam organisasi saraf dan seluler. Perubahan ekspresi ini mencerminkan respons imun bawaan yang diaktifkan dalam sel epitel dan menyoroti perbedaan dibandingkan dengan sel imun primer, seperti makrofag, yang menunjukkan respons inang yang berbeda dalam kondisi serupa. Temuan tersebut menggarisbawahi kegunaan sel CRFK dalam pemodelan interaksi inang-patogen tahap awal dan evaluasi strategi antivirus.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami