CRFK

קו התאים CRFK (Crandell-Rees Feline Kidney) הוא מודל מבוסס היטב, שמקורו בקליפת הכליה של עובר חתול תקין. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקר וירולוגי, במיוחד לחקר נגיפים של חתולים כגון נגיף הדלקת הצפק המדבקת של חתולים (FIPV) ונגיף ההרפס של חתולים (FHV-1). תאי CRFK הם בעלי רגישות גבוהה למגוון נגיפים של חתולים, מה שהופך אותם לבעלי ערך רב בפיתוח חיסונים ובבדיקות וירולוגיות. לדוגמה, תאים אלה משמשים לייצור ולבדיקה של חיסונים חיים מוחלשים, כגון חיסוני ה-FVRCP, המגנים מפני רינוטראכיטיס בחתולים, קליציווירוס ופנלוקופניה. תפקידו של קו התאים במחקרים על שכפול נגיפי חשף תובנות מרכזיות לגבי האינטראקציות בין המאכסן לנגיף והשפעות ציטופתיות הנגרמות על ידי נגיפים, כגון היווצרות סינציטיה ושינויים במורפולוגיה התאית.

מחקרים אחרונים הדגישו את האתגרים הכרוכים בשימוש בתאי CRFK לפיתוח חיסונים, בשל סיכוני זיהום הנשקפים מרטרו-וירוסים אנדוגניים (ERVs). באופן ספציפי, תאי CRFK יכולים לייצר את נגיף ה-RD-114 המדבק, רטרו-וירוס אנדוגני של חתולים, באמצעות אירועי רקומבינציה. כדי להתמודד עם חששות בטיחות אלה, נעשה שימוש בטכנולוגיות לעריכת גנום כגון TALENs כדי להשבית את גני ה-env של הרצפים הקשורים ל-RD-114, ובכך להפחית את הסיכון לזיהום ב-ERV בייצור החיסונים. שינויים אלה אינם פוגעים בכושר ההישרדות של תאי CRFK, ותאי ה-RDKO_CRFK המהונדסים הראו פרופילי בטיחות משופרים לשימוש בייצור מוצרים ביולוגיים.

יתרה מכך, ניתוחים טרנסקריפטומיים של תאי CRFK הדגימו את פרופילי הביטוי הגנטי הדיפרנציאליים שלהם בתגובה לזיהומים נגיפיים. עם ההדבקה ב-FIPV, תאי CRFK מעלים את הרגולציה של מסלולים שונים הקשורים למערכת החיסון, כולל איתות קולטני Toll-like, מסלולי MAPK ו-JAK-STAT, תוך שהם מפגינים גם ירידה משמעותית ברמת המסלולים המעורבים בארגון העצבי והתאי. שינויים אלה בביטוי משקפים את התגובות החיסוניות המולדות המופעלות בתאי האפיתל ומדגישים הבדלים בהשוואה לתאי חיסון ראשוניים, כגון מקרופאגים, המפגינים תגובות מארח מובחנות בתנאים דומים. ממצאים אלה מדגישים את התועלת של תאי CRFK במודלינג של אינטראקציות בין המארח לפתוגן בשלב מוקדם ובהערכת אסטרטגיות אנטי-ויראליות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו