HaCaT-ras II-4

HaCaT-ras II-4 ląstelės yra puikus ir plačiai ištirtas biologijos mokslo ląstelių modelis. Šios ląstelės yra gautos iš spontaniškai imortalizuotų žmogaus odos keratinocitų, vadinamų HaCaT ląstelėmis, kurios buvo modifikuotos transfekcijos būdu naudojant c-Ha-ras (EJ) onkogeną. Šių ląstelių atranka buvo pagrįsta jų atsparumu selektyviam antibiotikui G418, kaip aprašyta išsamiame tyrime, kurį 1990 m. atliko Boukamp ir kt.

Viena iš svarbių HaCaT-ras II-4 ląstelių savybių yra jų navikinis pobūdis. Kai šios kloninės ląstelės įšvirkščiamos į Balb/c-nu/nu peles, jos pasižymi įdomiu elgesiu - suformuoja labai diferencijuotas ir lokaliai invazines plokščialąstelines karcinomas. Ši unikali savybė leidžia mokslininkams tirti navikų vystymosi ir progresavimo mechanizmus kontroliuojamoje eksperimentinėje aplinkoje.

HaCaT-ras II-4 ląstelės daugiausia yra gautos iš kaukaziečių populiacijos, todėl moksliniuose tyrimuose yra svarbios konkrečiai etninei grupei. Dėl savo kilmės ir savybių jos yra neįkainojamas šaltinis mokslininkams, besidomintiems įvairiais odos biologijos ir diferenciacijos aspektais.

Šios ląstelės pasižymi iš dalies arba visiškai diferencijuotu fenotipu įprastomis kultūros sąlygomis. Šį fenotipą lemia gausus kalcio kiekis tiek tradicinėse terpėse, tiek fetaliniame galvijų serume, kuris sudaro idealias sąlygas ląstelėms pasižymėti savybėmis, panašiomis į subrendusių odos ląstelių savybes. Ši savybė leidžia mokslininkams tirti sudėtingus procesus, susijusius su odos vystymusi, žaizdų gijimu ir epidermio diferenciacija.

HaCaT-ras II-4 ląstelės, pasižyminčios navikiniu pobūdžiu ir gebėjimu atkartoti odos biologiją in vitro, suteikia unikalią galimybę tirti molekulinius kelius, susijusius su odos vėžiu ir kitais su oda susijusiais sutrikimais. Naudodami šį išskirtinį ląstelių modelį, mokslininkai gali geriau suprasti pagrindinius navikinės genezės mechanizmus, invazinį potencialą ir terapines intervencijas.

HaCaT-ras II-4 ląstelės yra labai svarbi priemonė biologijos mokslų tyrimams, ypač odos biologijos ir diferenciacijos tyrimams. Dėl jų kilmės iš spontaniškai imortalizuotų žmogaus odos keratinocitų, modifikacijos c-Ha-ras (EJ) onkogenu ir vėlesnės navikinės elgsenos pelėse jos yra neįkainojamos tiriant su oda susijusias ligas ir gydymo metodus. Pasinaudodami unikaliomis HaCaT-ras II-4 ląstelių savybėmis, mokslininkai gali geriau suprasti odos biologiją ir prisidėti prie medicininių žinių ir įvairių odos ligų gydymo galimybių plėtojimo.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Išmeskite seną terpę: Iš kolbų išimkite seną terpę.
2. Išplaukite ląsteles: Į T25 kolbas įpilkite 3-5 ml PBS (be kalcio ir magnio), o į T75 kolbas - 5-10 ml, kad išplautumėte prilipusias ląsteles.
3. Įpilkite EDTA tirpalo: Ląstelių sluoksnį visiškai užpilkite šviežiai paruoštu 0,05 % EDTA tirpalu - 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms.
4. Inkubavimas: Inkubuokite kolbas 37 laipsnių Celsijaus temperatūroje 10 minučių.
5. Įpilkite tripsino ir EDTA tirpalo: Po inkubacijos į kolbas įpilkite šviežiai paruošto tripsino ir EDTA tirpalo (0,05 % tripsino, 0,025 % EDTA), įsitikinkite, kad ląstelės yra visiškai padengtos - T25 kolboms naudokite 1 ml, o T75 kolboms - 2,5 ml.
6. Stebėkite atsiskyrimą: Stebėkite ląsteles, kurios turėtų atsiskirti per 1-2 minutes.
7. Neutralizuokite tripsiną: Įpilkite FBS turinčios ląstelių kultūrų terpės, kad tripsino veikla būtų sustabdyta.
8. Perkelkite ląsteles: Ląstelių suspensiją išpilstykite į naujas kolbas, iš anksto pripildytas šviežios terpės.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime