HaCaT-ras II-4

HaCaT-ras II-4 -solut ovat merkittävä ja laajasti tutkittu solumalli biologisessa tieteessä. Nämä solut ovat peräisin spontaanisti kuolemattomiksi muuttuneista ihmisen ihon keratinosyyteistä, joita kutsutaan HaCaT-soluiksi ja jotka on muunnettu transfektoimalla c-Ha-ras (EJ) onkogeenilla. Näiden solujen valinta perustui niiden resistenssiin G418:lle, joka on selektiivinen antibiootti, kuten Boukampin ja muiden vuonna 1990 tekemässä kattavassa tutkimuksessa kuvattiin.

Yksi HaCaT-ras II-4 -solujen merkittävä ominaisuus on niiden kasvainherkkyys. Kun nämä klooniset solut ruiskutetaan Balb/c-nu/nu -hiiriin, ne käyttäytyvät kiehtovasti muodostaen hyvin erilaistuneita ja paikallisesti invasiivisia levyepiteelisolusyöpiä. Tämän ainutlaatuisen ominaisuuden ansiosta tutkijat voivat tutkia kasvainten kehittymis- ja etenemismekanismeja kontrolloidussa kokeellisessa ympäristössä.

HaCaT-ras II-4 -solut ovat pääasiassa peräisin valkoihoisesta väestöstä, mikä takaa tieteellisissä tutkimuksissa merkityksen tietylle etniselle ryhmälle. Niiden alkuperä ja ominaisuudet tekevät niistä korvaamattoman arvokkaan resurssin tutkijoille, jotka ovat kiinnostuneita ihon biologian ja erilaistumisen eri näkökohtien tutkimisesta.

Näillä soluilla on tyypillisissä viljelyolosuhteissa osittain tai täysin erilaistunut fenotyyppi. Tämä fenotyyppi johtuu kalsiumin runsaasta esiintymisestä sekä perinteisessä elatusaineessa että naudan sikiöseerumissa, mikä tarjoaa soluille ihanteellisen ympäristön, jossa ne voivat osoittaa kypsän ihon soluja muistuttavia ominaisuuksia. Tämän ominaisuuden ansiosta tutkijat voivat tutkia ihon kehitykseen, haavan paranemiseen ja epidermiksen erilaistumiseen liittyviä monimutkaisia prosesseja.

Koska HaCaT-ras II-4 -solut ovat kasvainherkkiä ja kykenevät jäljittelemään ihon biologiaa in vitro, ne tarjoavat ainutlaatuisen mahdollisuuden tutkia ihosyöpään ja muihin ihoon liittyviin sairauksiin liittyviä molekyylireittejä. Käyttämällä tätä poikkeuksellista solumallia tutkijat voivat saada syvällisempää tietoa kasvainten syntymekanismeista, invasiivisesta potentiaalista ja terapeuttisista interventioista.

HaCaT-ras II-4 -solut ovat tärkeä väline biologisten tieteiden tutkimuksessa, erityisesti ihon biologian ja erilaistumisen tutkimuksessa. Ne ovat peräisin spontaanisti kuolemattomiksi muuttuneista ihmisen ihon keratinosyyteistä, ne on muunnettu c-Ha-ras (EJ) onkogeenilla ja ne käyttäytyvät sen jälkeen hiirissä kasvainten muodostajana, minkä vuoksi ne ovat korvaamattomia ihoon liittyvien sairauksien ja hoitokeinojen tutkimisessa. Hyödyntämällä HaCaT-ras II-4 -solujen ainutlaatuisia ominaisuuksia tutkijat voivat päästä syvempään ymmärrykseen ihon biologiasta ja edistää lääketieteellistä tietämystä ja hoitovaihtoehtoja erilaisiin ihosairauksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Hävitä vanha väliaine: Poista vanha väliaine pulloista.
2. Pese solut: Lisää 3-5 ml PBS:ää (ilman kalsiumia ja magnesiumia) T25-pulloihin tai 5-10 ml T75-pulloihin tarttuneiden solujen pesemiseksi.
3. Lisää EDTA-liuos: Peitä solukerros kokonaan juuri valmistetulla 0,05-prosenttisella EDTA-liuoksella - käytä 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa.
4. Inkubointi: Inkuboi pulloja 37 asteessa 10 minuutin ajan.
5. Lisää trypsiini/EDTA-liuos: Lisää inkuboinnin jälkeen tuore trypsiini/EDTA-liuos (0,05 % trypsiini, 0,025 % EDTA) pulloihin varmistaen, että solut peittyvät kokonaan - käytä 1 ml T25-pulloihin ja 2,5 ml T75-pulloihin.
6. Seuraa irtoamista: Tarkkaile soluja, joiden pitäisi irrota 1-2 minuutin kuluessa.
7. Neutraloi trypsiini: Lisää FBS:ää sisältävää soluviljelyalustaa trypsiinin aktiivisuuden pysäyttämiseksi.
8. Siirrä solut: Annostele solususpensio uusiin pulloihin, jotka on esitäytetty tuoreella elatusaineella.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa