HaCaT-ras II-4

HaCaT-ras II-4細胞は、生物科学において注目され、広く研究されている細胞モデルである。これらの細胞は、HaCaT細胞として知られる自然発生的に不死化したヒト皮膚ケラチノサイトに由来し、c-Ha-ras（EJ）癌遺伝子をトランスフェクションして改変したものである。これらの細胞の選択は、1990年にBoukampらによって行われた包括的研究に記載されているように、選択的抗生物質であるG418に対する耐性に基づいていた。

HaCaT-ras II-4細胞の特筆すべき特徴の一つは、その腫瘍形成性である。これらのクローン細胞をBalb/c-nu/nuマウスに注射すると、高度に分化した局所浸潤性の扁平上皮癌を形成するという魅力的な挙動を示す。このユニークな性質により、研究者は制御された実験環境の中で腫瘍の発生と進行のメカニズムを探求することができる。

HaCaT-ras II-4細胞は、主に白人集団に由来し、科学的調査において特定の民族集団との関連性を保証している。その起源と特徴から、様々な皮膚の生物学的、分化的側面の研究に興味を持つ研究者にとって、非常に貴重なリソースである。

これらの細胞は、典型的な培養条件下では、部分分化から完全分化の表現型を持っている。この表現型は、従来の培地とウシ胎児血清の両方にカルシウムが豊富に含まれていることに起因しており、細胞が成熟した皮膚細胞に似た特徴を示すための理想的な環境を提供している。この特徴により、研究者は皮膚の発生、創傷治癒、表皮分化に関与する複雑なプロセスを調べることができる。

HaCaT-ras II-4細胞は、その腫瘍形成性とin vitroでの皮膚生物学の再現能力により、皮膚癌やその他の皮膚関連疾患に関連する分子経路を探索するユニークな機会を提供する。この卓越した細胞モデルを利用することで、研究者は腫瘍形成、浸潤能、治療介入の基礎となるメカニズムについて、より深い洞察を得ることができる。

HaCaT-ras II-4細胞は、生物科学研究、特に皮膚生物学と分化研究のための重要なツールである。自然発生的に不死化したヒト皮膚ケラチノサイトに由来し、c-Ha-ras（EJ）癌遺伝子で修飾され、その後マウスで腫瘍化挙動を示すことから、皮膚に関連した疾患や治療アプローチを研究する上で非常に貴重な細胞である。HaCaT-ras II-4細胞のユニークな特徴を利用することにより、研究者は皮膚生物学のより深い理解を解き明かし、様々な皮膚疾患に対する医学的知識と治療法の進歩に貢献することができる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. 古いメデュームを捨てる：フラスコから古いメデュームを取り除く。
2. 細胞を洗浄する：T25フラスコには3～5ml、T75フラスコには5～10mlのPBS（カルシウムとマグネシウムを含まない）を加え、接着細胞を洗浄する。
3. EDTA溶液を加える：T25フラスコには1～2 ml、T75フラスコには2.5 mlを使用する。
4. インキュベーション：フラスコを37℃で10分間インキュベートする。
5. トリプシン/EDTA溶液を加える：インキュベーション後、調製したばかりのトリプシン／EDTA溶液（0.05％トリプシン、0.025％EDTA）をフラスコに加え、細胞が完全に覆われていることを確認する。
6. 剥離を観察する：細胞は1～2分以内に剥離するはずです。
7. トリプシンを中和する：FBS含有細胞培養メデュームを加え、トリプシン活性を停止させる。
8. 細胞を移す：細胞懸濁液を、新鮮な培養メデュームをあらかじめ入れた新しいフラスコに分注する。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。