HaCaT-ras II-4

Bunky HaCaT-ras II-4 sú pozoruhodným a rozsiahle študovaným bunkovým modelom v biologickej vede. Tieto bunky pochádzajú zo spontánne imortalizovaných ľudských kožných keratinocytov, známych ako bunky HaCaT, ktoré boli modifikované transfekciou onkogénom c-Ha-ras (EJ). Výber týchto buniek bol založený na ich rezistencii voči selektívnemu antibiotiku G418, ako je opísané v komplexnej štúdii, ktorú vykonal Boukamp a kol. v roku 1990.

Jednou z pozoruhodných vlastností buniek HaCaT-ras II-4 je ich nádorová povaha. Keď sa tieto klonálne bunky injikujú do myší Balb/c-nu/nu, vykazujú fascinujúce správanie tým, že vytvárajú vysoko diferencované a lokálne invazívne skvamocelulárne karcinómy. Táto jedinečná vlastnosť umožňuje výskumníkom skúmať mechanizmy vývoja a progresie nádorov v kontrolovanom experimentálnom prostredí.

Bunky HaCaT-ras II-4 pochádzajú prevažne z kaukazskej populácie, čo zabezpečuje relevantnosť pre špecifickú etnickú skupinu vo vedeckých výskumoch. Ich pôvod a vlastnosti z nich robia neoceniteľný zdroj pre výskumníkov, ktorí sa zaujímajú o štúdium rôznych aspektov biológie a diferenciácie kože.

Tieto bunky majú čiastočne až úplne diferencovaný fenotyp v typických kultivačných podmienkach. Tento fenotyp sa pripisuje hojnej prítomnosti vápnika v tradičných médiách aj vo fetálnom hovädzom sére, ktoré poskytujú ideálne prostredie pre bunky, aby vykazovali vlastnosti podobné vlastnostiam zrelých kožných buniek. Táto vlastnosť umožňuje výskumníkom skúmať zložité procesy, ktoré sa podieľajú na vývoji kože, hojení rán a diferenciácii epidermy.

Vďaka svojej nádorovej povahe a schopnosti replikovať biológiu kože in vitro ponúkajú bunky HaCaT-ras II-4 jedinečnú príležitosť na skúmanie molekulárnych dráh spojených s rakovinou kože a inými poruchami súvisiacimi s kožou. Využitím tohto výnimočného bunkového modelu môžu výskumníci získať hlbší pohľad na základné mechanizmy nádorového bujnenia, invazívny potenciál a terapeutické zásahy.

Bunky HaCaT-ras II-4 sú dôležitým nástrojom pre biologický vedecký výskum, konkrétne v oblasti biológie kože a diferenciačných štúdií. Ich pôvod zo spontánne imortalizovaných ľudských kožných keratinocytov, modifikácia onkogénom c-Ha-ras (EJ) a následné nádorové správanie na myšiach z nich robí neoceniteľné bunky na skúmanie ochorení súvisiacich s kožou a terapeutických prístupov. Využitím jedinečných vlastností buniek HaCaT-ras II-4 môžu výskumníci odhaliť hlbšie pochopenie biológie kože a prispieť k rozšíreniu lekárskych poznatkov a možností liečby rôznych kožných ochorení.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Vyradenie starého média: Odstráňte staré médium z banky.
2. Premyte bunky: Pridajte 3 - 5 ml PBS (bez vápnika a horčíka) do banky T25 alebo 5 - 10 ml do banky T75, aby ste premyli priľnuté bunky.
3. Pridajte roztok EDTA: Vrstvu buniek úplne pokryte čerstvo pripraveným 0,05 % roztokom EDTA - použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75.
4. Inkubácia: Inkubujte banky pri teplote 37 °C počas 10 minút.
5. Pridajte roztok trypsínu/EDTA: Po inkubácii pridajte do baniek čerstvo pripravený roztok trypsínu/EDTA (0,05 % trypsín, 0,025 % EDTA), pričom sa uistite, že bunky sú úplne pokryté - použite 1 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75.
6. Monitorujte oddeľovanie: Pozorujte bunky, ktoré by sa mali oddeliť do 1 - 2 minút.
7. Neutralizujte trypsín: Pridajte médium s obsahom FBS, aby ste zastavili aktivitu trypsínu.
8. Preneste bunky: Bunková suspenzia sa preleje do nových fliaš vopred naplnených čerstvým kultivačným médiom.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke