HaCaT-ras II-4

تُعد خلايا HaCaT-ras II-4 نموذجًا خلويًا رائعًا ومدروسًا على نطاق واسع في العلوم البيولوجية. تُشتق هذه الخلايا من الخلايا الكيراتينية الجلدية البشرية الخالدة تلقائيًا، والمعروفة باسم خلايا HaCaT، والتي تم تعديلها من خلال نقل الجين الورمي c-Ha-ras (EJ). وقد استند اختيار هذه الخلايا إلى مقاومتها للمضاد الحيوي الانتقائي G418، كما هو موضح في الدراسة الشاملة التي أجراها بوكامب وآخرون في عام 1990.

تتمثل إحدى الخصائص البارزة لخلايا HaCaT-ras II-4 في طبيعتها الورمية. عندما يتم حقن هذه الخلايا النسيليّة في فئران Balb/c-nu/nu/nu، فإنها تُظهر سلوكًا رائعًا من خلال تشكيل أورام سرطانية حرشفية الخلايا شديدة التمايز والغازية محليًا. وتتيح هذه الخاصية الفريدة للباحثين استكشاف آليات تطور الورم وتطوره في بيئة تجريبية خاضعة للرقابة.

يتم اشتقاق خلايا HaCaT-ras II-4 في الغالب من السكان القوقازيين، مما يضمن ملاءمتها لمجموعة عرقية محددة في التحقيقات العلمية. ويجعلها أصلها وخصائصها مصدراً لا يقدر بثمن للباحثين المهتمين بدراسة مختلف جوانب بيولوجيا الجلد والتمايز.

وتمتلك هذه الخلايا نمطاً ظاهرياً متمايزاً جزئياً إلى متمايز كلياً في ظل ظروف الاستزراع النموذجية. ويُعزى هذا النمط الظاهري إلى وفرة الكالسيوم في كل من الوسائط التقليدية ومصل البقر الجنيني، مما يوفر بيئة مثالية للخلايا لإظهار خصائص تشبه خصائص خلايا الجلد الناضجة. تسمح هذه الميزة للباحثين بالتحقيق في العمليات المعقدة التي ينطوي عليها نمو الجلد والتئام الجروح وتمايز البشرة.

وتوفر خلايا HaCaT-ras II-4 فرصة فريدة لاستكشاف المسارات الجزيئية المرتبطة بسرطان الجلد والاضطرابات الأخرى المتعلقة بالجلد، وذلك بفضل طبيعتها الورمية وقدرتها على تكرار بيولوجيا الجلد في المختبر. من خلال استخدام هذا النموذج الخلوي الاستثنائي، يمكن للباحثين اكتساب رؤى أعمق في الآليات الكامنة وراء نشأة الورم وإمكانية التوغل والتدخلات العلاجية.

تُعد خلايا HaCaT-ras II-4 أداة حيوية لأبحاث العلوم البيولوجية، وتحديداً في دراسات بيولوجيا الجلد والتمايز. إن أصلها من الخلايا الكيراتينية الجلدية البشرية غير الخالدة تلقائيًا، وتعديلها باستخدام الجين الورمي c-Ha-ras (EJ)، وسلوكها الورمي اللاحق في الفئران يجعلها لا تقدر بثمن لدراسة الأمراض المتعلقة بالجلد والأساليب العلاجية. من خلال تسخير الخصائص الفريدة لخلايا HaCaT-ras II-4، يمكن للباحثين فتح فهم أعمق لبيولوجيا الجلد والمساهمة في تطوير المعرفة الطبية وخيارات العلاج لمختلف الاضطرابات الجلدية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. تخلص من الوسط القديم: إزالة الوسط القديم من القوارير.
2. غسل الخلايا: أضف 3-5 مل من PBS (بدون الكالسيوم والمغنيسيوم) إلى قوارير T25، أو 5-10 مل إلى قوارير T75، لغسل الخلايا الملتصقة.
3. أضف محلول EDTA: قم بتغطية طبقة الخلية بالكامل بمحلول EDTA بنسبة 0.05% مُعد حديثًا - استخدم 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75.
4. الاحتضان: احتضان القوارير عند 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
5. أضف محلول التربسين/إيدتا: بعد الحضانة، أضف محلول التربسين/إيدتا المحضر حديثًا (0.05% تريبسين، 0.025% إيدتا) إلى القوارير، مع التأكد من تغطية الخلايا بالكامل - استخدم 1 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75.
6. مراقبة الانفصال: مراقبة الخلايا، والتي يجب أن تنفصل في غضون 1-2 دقيقة.
7. تحييد التريبسين: أضف وسط مزرعة الخلايا المحتوي على FBS لإيقاف نشاط التربسين.
8. نقل الخلايا: توزيع معلق الخلية في قوارير جديدة مملوءة مسبقاً بوسط مزرعة جديد.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان