Pereiti prie turinio
KHM-5M
Audinys
Skydliaukė
Liga
Skydliaukės anaplastinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
KHM/5M, KHM5M

Dokumentai

KHM-5M

Cell line · Prekės numeris 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KHM-5M ląstelių linija yra svarbus modelis, gautas iš paciento, sergančio nediferencijuota skydliaukės karcinoma, kuri komplikavosi neutrofilija ir piktybiniu pleuritu. Šiai ląstelių linijai būdinga didelė neutrofilų chemotaktinių veiksnių, ypač žmogaus interleukino 8 (IL-8) ir granulocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojančio veiksnio (GM-CSF), gamyba. Šie veiksniai yra labai svarbūs neutrofilų, kurie atlieka pagrindinį vaidmenį imuniniame atsako ir uždegimo procese, įdarbinimui ir aktyvinimui. Buvo įrodyta, kad KHM-5M ląstelės pasižymi ypatingu chemotaktiniu aktyvumu, o ši savybė buvo patvirtinta atliekant in vitro eksperimentus, kuriuose naudota sąlyginė ląstelių terpė ir modifikuotas Boydeno kameros metodas.

Be to, KHM-5M ląstelės buvo persodintos nuogoms žiurkėms, kur buvo pastebėta neutrofilų infiltracija persodinto naviko audinyje ir aplink jį. Šis atradimas pabrėžia KHM-5M kaip modelio svarbą tiriant naviko ląstelių ir imuninės mikroaplinkos sąveiką, ypač susijusią su neutrofilų įdarbinimu ir funkcijomis. Ši ląstelių linija taip pat yra vertingas įrankis tiriant molekulinius mechanizmus, lemiančius citokinų gamybą vėžyje ir vėlesnį patologinių požymių modifikavimą. Naudojant DNR klonavimo metodus, buvo patvirtintas IL-8 ir GM-CSF priskiriamas chemotaktinis aktyvumas, todėl KHM-5M ląstelių linija tapo svarbiu šaltiniu tiriant citokinų sukeliamą naviko ir imuninės sistemos sąveiką.

Audinys
Skydliaukė
Liga
Skydliaukės anaplastinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroblastai
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
27 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
KHM-5M (Cytion katalogo numeris 305148)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
65 metai