Gå til innholdet
KHM-5M
Vev
Skjoldbruskkjertelen
Sykdom
Anaplastisk karsinom i skjoldbruskkjertelen
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
KHM/5M, KHM5M

Dokumenter

KHM-5M

Cell line · Produktnummer 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KHM-5M-cellelinjen er en viktig modell avledet fra en pasient med udifferensiert thyreoideakarsinom komplisert av nøytrofili og malign pleuritt. Denne cellelinjen kjennetegnes av en betydelig produksjon av nøytrofile kjemotaktiske faktorer, spesielt humant interleukin 8 (IL-8) og granulocytt-makrofag kolonistimulerende faktor (GM-CSF). Disse faktorene er avgjørende for rekruttering og aktivering av nøytrofile celler, som spiller en sentral rolle i immunresponsen og inflammasjon. KHM-5M-cellene viste seg å ha en ekstrem kjemotaktisk aktivitet, en egenskap som ble underbygget gjennom in vitro-eksperimenter ved bruk av kondisjonert media fra cellene og modifisert Boyden-kammerteknikk.

I tillegg ble KHM-5M-celler transplantert inn i nakenrotter, der infiltrasjon av nøytrofile celler ble observert i og rundt det transplanterte tumorvevet. Dette funnet understreker relevansen av KHM-5M som modell for å studere samspillet mellom tumorceller og immunmikromiljøet, særlig i forhold til rekruttering og funksjon av nøytrofile. Cellelinjen er også et verdifullt verktøy for å undersøke de molekylære mekanismene som ligger til grunn for cytokinproduksjon i kreft og den påfølgende modifiseringen av patologiske trekk. Ved hjelp av DNA-kloningsteknikker ble de kjemotaktiske aktivitetene som tilskrives IL-8 og GM-CSF bekreftet, noe som befester KHM-5M-cellelinjen som en viktig ressurs for forskning på cytokin-drevne interaksjoner mellom tumor og immunforsvar.

Vev
Skjoldbruskkjertelen
Sykdom
Anaplastisk karsinom i skjoldbruskkjertelen
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast
Fordoblingstid
27 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KHM-5M (Cytion-katalognummer 305148)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
65 år