Přejít na obsah
KHM-5M
Tkáň
Štítná žláza
Nemoc
Anaplastický karcinom štítné žlázy
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
KHM/5M, KHM5M

Dokumenty

KHM-5M

Cell line · Číslo výrobku 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KHM-5M je důležitým modelem odvozeným od pacienta s nediferencovaným karcinomem štítné žlázy komplikovaným neutrofilií a maligní pleuritidou. Tato buněčná linie se vyznačuje významnou produkcí chemotaktických faktorů neutrofilů, konkrétně lidského interleukinu 8 (IL-8) a faktoru stimulujícího kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF). Tyto faktory jsou klíčové pro nábor a aktivaci neutrofilů, které hrají klíčovou roli v imunitní odpovědi a zánětu. Bylo prokázáno, že buňky KHM-5M mají extrémní chemotaktickou aktivitu, což bylo doloženo pokusy in vitro s použitím kondicionovaného média z buněk a modifikované techniky Boydenovy komory.

Kromě toho byly buňky KHM-5M transplantovány nahým potkanům, u nichž byla pozorována infiltrace neutrofilů v transplantované nádorové tkáni a jejím okolí. Toto zjištění podtrhuje význam KHM-5M jako modelu pro studium interakcí mezi nádorovými buňkami a imunitním mikroprostředím, zejména ve vztahu k náboru a funkci neutrofilů. Tato buněčná linie také slouží jako cenný nástroj pro zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem produkce cytokinů u nádorových onemocnění a následné modifikace patologických znaků. Pomocí technik klonování DNA byla potvrzena chemotaktická aktivita přisuzovaná IL-8 a GM-CSF, což upevnilo postavení buněčné linie KHM-5M jako významného zdroje pro výzkum interakcí mezi nádorem a imunitním systémem, které jsou řízeny cytokiny.

Tkáň
Štítná žláza
Nemoc
Anaplastický karcinom štítné žlázy
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty
Doba zdvojnásobení
27 hodin

04Identifikátory

Citace
KHM-5M (katalogové číslo Cytion 305148)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
65 let