Pāriet uz saturu
KHM-5M
Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
KHM/5M, KHM5M

Dokumenti

KHM-5M

Cell line · Preces numurs 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KHM-5M šūnu līnija ir svarīgs modelis, kas iegūts no pacienta ar nediferencētu vairogdziedzera karcinomu, kas komplicējās ar neitrofiliju un ļaundabīgu pleirītu. Šai šūnu līnijai ir raksturīga ievērojama neitrofilu hemotaktisko faktoru, īpaši cilvēka interleikīna 8 (IL-8) un granulocītu-makrofāgu koloniju stimulējošā faktora (GM-CSF), ražošana. Šiem faktoriem ir izšķiroša nozīme neitrofilu rekrutēšanā un aktivizēšanā, kam ir izšķiroša loma imūnās atbildes reakcijas un iekaisuma procesā. Tika pierādīts, ka KHM-5M šūnām piemīt ārkārtīgi liela hemotaktiskā aktivitāte, un šī īpašība tika pamatota in vitro eksperimentos, izmantojot šūnu kondicionēto barotni un modificēto Boidena kameras metodi.

Turklāt KHM-5M šūnas tika transplantētas kailām žurkām, kur tika novērota neitrofilu infiltrācija transplantētā audzēja audos un ap tiem. Šis atklājums uzsver KHM-5M kā modeļa nozīmi audzēja šūnu un imūnās mikrovides mijiedarbības izpētei, jo īpaši saistībā ar neitrofilu rekrutēšanu un funkciju. Šūnu līnija kalpo arī kā vērtīgs instruments, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas nosaka citokīnu veidošanos vēža gadījumā un no tā izrietošās patoloģisko pazīmju modifikācijas. Izmantojot DNS klonēšanas paņēmienus, tika apstiprināta IL-8 un GM-CSF piemītošā hemotaktiskā aktivitāte, tādējādi nostiprinot KHM-5M šūnu līniju kā nozīmīgu resursu pētījumiem par citokīnu izraisītu audzēja un imūnās sistēmas mijiedarbību.

Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
27 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KHM-5M (Cytion kataloga numurs 305148)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
65 gadi