Μετάβαση στο περιεχόμενο
KHM-5M
Ιστός
Θυρεοειδής
Ασθένεια
Αναπλαστικό καρκίνωμα του θυρεοειδούς αδένα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
KHM/5M, KHM5M

Έγγραφα

KHM-5M

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά KHM-5M είναι ένα σημαντικό μοντέλο που προέρχεται από έναν ασθενή με αδιαφοροποίητο καρκίνωμα του θυρεοειδούς που επιπλέκεται από ουδετεροφιλία και κακοήθη πλευρίτιδα. Αυτή η κυτταρική σειρά χαρακτηρίζεται από τη σημαντική παραγωγή χημειοτακτικών παραγόντων των ουδετερόφιλων, συγκεκριμένα της ανθρώπινης ιντερλευκίνης 8 (IL-8) και του παράγοντα διέγερσης αποικιών κοκκιοκυττάρων-μακροφάγων (GM-CSF). Αυτοί οι παράγοντες είναι ζωτικής σημασίας για την προσέλκυση και την ενεργοποίηση των ουδετερόφιλων, τα οποία διαδραματίζουν καθοριστικό ρόλο στην ανοσολογική απόκριση και τη φλεγμονή. Τα κύτταρα KHM-5M αποδείχθηκε ότι διαθέτουν ακραία χημειοτακτική δραστηριότητα, χαρακτηριστικό που τεκμηριώθηκε μέσω πειραμάτων in vitro με τη χρήση κλιματιζόμενου μέσου από τα κύτταρα και την τροποποιημένη τεχνική θαλάμου Boyden.

Επιπλέον, τα κύτταρα KHM-5M μεταμοσχεύθηκαν σε γυμνούς αρουραίους, όπου παρατηρήθηκε διήθηση ουδετερόφιλων μέσα και γύρω από τον μεταμοσχευμένο καρκινικό ιστό. Το εύρημα αυτό υπογραμμίζει τη σημασία του KHM-5M ως μοντέλου για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των καρκινικών κυττάρων και του ανοσοποιητικού μικροπεριβάλλοντος, ιδίως σε σχέση με τη στρατολόγηση και τη λειτουργία των ουδετερόφιλων. Η κυτταρική σειρά χρησιμεύει επίσης ως πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την παραγωγή κυτταροκινών στον καρκίνο και την επακόλουθη τροποποίηση των παθολογικών χαρακτηριστικών. Μέσω τεχνικών κλωνοποίησης DNA, επιβεβαιώθηκαν οι χημειοτακτικές δραστηριότητες που αποδίδονται στην IL-8 και στον GM-CSF, εδραιώνοντας την κυτταρική σειρά KHM-5M ως σημαντική πηγή για την έρευνα των αλληλεπιδράσεων όγκου-ανοσοποιητικού συστήματος που προκαλούνται από κυτταροκίνες.

Ιστός
Θυρεοειδής
Ασθένεια
Αναπλαστικό καρκίνωμα του θυρεοειδούς αδένα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες
Χρόνος διπλασιασμού
27 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
KHM-5M (αριθμός καταλόγου Cytion 305148)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2975

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
65 χρόνια