KHM-5M

La línea celular KHM-5M es un importante modelo derivado de un paciente con carcinoma de tiroides indiferenciado complicado con neutrofilia y pleuresía maligna. Esta línea celular se caracteriza por su importante producción de factores quimiotácticos de neutrófilos, concretamente interleucina 8 humana (IL-8) y factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF). Estos factores son cruciales en el reclutamiento y la activación de neutrófilos, que desempeñan un papel fundamental en la respuesta inmunitaria y la inflamación. Las células KHM-5M demostraron poseer una actividad quimiotáctica extrema, un rasgo que se corroboró mediante experimentos in vitro utilizando medios condicionados de las células y la técnica de la cámara de Boyden modificada.

Además, las células KHM-5M se trasplantaron a ratas desnudas, donde se observó la infiltración de neutrófilos en el tejido tumoral trasplantado y a su alrededor. Este hallazgo subraya la relevancia de KHM-5M como modelo para estudiar las interacciones entre las células tumorales y el microambiente inmunitario, especialmente en relación con el reclutamiento y la función de los neutrófilos. La línea celular también sirve como valiosa herramienta para investigar los mecanismos moleculares subyacentes a la producción de citoquinas en el cáncer y la consiguiente modificación de las características patológicas. Mediante técnicas de clonación de ADN, se confirmaron las actividades quimiotácticas atribuidas a la IL-8 y el GM-CSF, lo que consolidó la línea celular KHM-5M como un recurso importante para la investigación de las interacciones tumor-inmune impulsadas por citocinas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía