Mine otse sisu juurde
KHM-5M
Kude
Kilpnääre
Haigus
Kilpnäärme anaplastiline kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
KHM/5M, KHM5M

Dokumendid

KHM-5M

Cell line · Toote number 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KHM-5M rakuliin on oluline mudel, mis on saadud patsiendilt, kellel on diferentseerimata kilpnäärmekartsinoom, mis on komplitseeritud neutrofiilia ja pahaloomulise pleuriidiga. Seda rakuliini iseloomustab neutrofiilide kemotaktiliste faktorite, eriti inimese interleukiin 8 (IL-8) ja granulotsüütide-makrofaagide kolooniaid stimuleeriva faktori (GM-CSF) märkimisväärne produktsioon. Need faktorid on olulised neutrofiilide värbamisel ja aktiveerimisel, millel on keskne roll immuunvastuses ja põletikus. KHM-5M rakkude äärmuslik kemotaktiline aktiivsus on tõestatud in vitro katsetega, milles kasutati rakkude konditsioneeritud keskkonda ja modifitseeritud Boydeni kambrimeetodit.

Lisaks siirdati KHM-5M rakke alasti rottidele, kus täheldati neutrofiilide infiltratsiooni siirdatud kasvajakoes ja selle ümbruses. See tulemus rõhutab KHM-5M-i tähtsust mudelina kasvajarakkude ja immuunsüsteemi mikrokeskkonna vahelise koostoime uurimiseks, eriti seoses neutrofiilide värbamise ja toimimisega. Rakuliin on ka väärtuslik vahend tsütokiinide tootmise aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks vähktõve korral ja sellele järgnevate patoloogiliste tunnuste muutmiseks. DNA-kloonimismeetodite abil kinnitati IL-8 ja GM-CSF-i kemotaktiline aktiivsus, mis kinnistas KHM-5M rakuliini kui olulist ressurssi tsütokiinide ja immuunsüsteemi vahelise koostoime uurimisel.

Kude
Kilpnääre
Haigus
Kilpnäärme anaplastiline kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Kahekordistumisaeg
27 tundi

04Tunnused

Viide
KHM-5M (Cytioni katalooginumber 305148)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
65 aastat