Preskoči na vsebino
KHM-5M
Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
KHM/5M, KHM5M

Dokumenti

KHM-5M

Cell line · Številka izdelka 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KHM-5M je pomemben model, pridobljen od bolnika z nediferenciranim karcinomom ščitnice, ki se je zapletel z nevtrofilijo in malignim plevritisom. Za to celično linijo je značilna velika proizvodnja kemotaktičnih dejavnikov nevtrofilcev, zlasti človeškega interlevkina 8 (IL-8) in dejavnika, ki stimulira kolonije granulocitov in makrofagov (GM-CSF). Ti dejavniki so ključnega pomena pri rekrutiranju in aktivaciji nevtrofilcev, ki imajo ključno vlogo pri imunskem odzivu in vnetju. Pokazalo se je, da imajo celice KHM-5M izjemno kemotaktično aktivnost, kar je bilo dokazano s poskusi in vitro z uporabo kondicioniranega medija iz celic in spremenjeno tehniko Boydenove komore.

Poleg tega so bile celice KHM-5M presajene v gole podgane, kjer so opazili infiltracijo nevtrofilcev v presajenem tumorskem tkivu in okoli njega. Ta ugotovitev poudarja pomen KHM-5M kot modela za preučevanje interakcij med tumorskimi celicami in imunskim mikrookoljem, zlasti v zvezi z rekrutiranjem in delovanjem nevtrofilcev. Celična linija služi tudi kot dragoceno orodje za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za proizvodnjo citokinov pri raku in posledično spreminjanje patoloških značilnosti. S tehnikami kloniranja DNK so bile potrjene kemotaktične aktivnosti, ki jih pripisujemo IL-8 in GM-CSF, kar je celično linijo KHM-5M utrdilo kot pomemben vir za raziskave interakcij med tumorjem in imunskim sistemom, ki jih povzročajo citokini.

Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Čas podvojitve
27 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
KHM-5M (kataloška številka Cytion 305148)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
65 let