Gå direkte til indholdet
KHM-5M
Væv
Skjoldbruskkirtlen
Sygdom
Anaplastisk karcinom i skjoldbruskkirtlen
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
KHM/5M, KHM5M

Dokumenter

KHM-5M

Cell line · Varenummer 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KHM-5M-cellelinjen er en vigtig model, der stammer fra en patient med udifferentieret thyroideakarcinom kompliceret af neutrofili og malign pleuritis. Denne cellelinje er kendetegnet ved sin betydelige produktion af neutrofile kemotaktiske faktorer, især humant interleukin 8 (IL-8) og granulocyt-makrofag kolonistimulerende faktor (GM-CSF). Disse faktorer er afgørende for rekruttering og aktivering af neutrofiler, som spiller en central rolle i immunresponsen og inflammation. KHM-5M-cellerne viste sig at have ekstrem kemotaktisk aktivitet, et træk, der blev underbygget gennem in vitro-eksperimenter med konditionerede medier fra cellerne og den modificerede Boyden-kammerteknik.

Derudover blev KHM-5M-celler transplanteret til nøgenrotter, hvor der blev observeret infiltration af neutrofiler i og omkring det transplanterede tumorvæv. Dette fund understreger relevansen af KHM-5M som en model til undersøgelse af samspillet mellem tumorceller og immunmikromiljøet, især i forhold til rekruttering og funktion af neutrofile. Cellelinjen fungerer også som et værdifuldt værktøj til at undersøge de molekylære mekanismer, der ligger til grund for cytokinproduktion i kræft og den efterfølgende ændring af patologiske træk. Gennem DNA-kloningsteknikker blev de kemotaktiske aktiviteter, der tilskrives IL-8 og GM-CSF, bekræftet, hvilket styrker KHM-5M-cellelinjen som en vigtig ressource til forskning i cytokin-drevne tumor-immuninteraktioner.

Væv
Skjoldbruskkirtlen
Sygdom
Anaplastisk karcinom i skjoldbruskkirtlen
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast
Fordoblingstid
27 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KHM-5M (Cytion-katalognummer 305148)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
65 år