.jpg)
- Тъкан
- Щитовидната жлеза
- Заболяване
- Анапластичен карцином на щитовидната жлеза
- Място на метастазите
- Плеврален излив
- Синоними
- KHM/5M, KHM5M
Документи
KHM-5M
Cell line · Номер на продукта 305148
The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...
Персонализиране / Препоръки
- KHM-5MCell line€650.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
Клетъчната линия KHM-5M е важен модел, получен от пациент с недиференциран карцином на щитовидната жлеза, усложнен с неутрофилия и малигнен плеврит. Тази клетъчна линия се характеризира със значително производство на неутрофилни хемотактични фактори, по-специално човешки интерлевкин 8 (IL-8) и гранулоцит-макрофажен колонистимулиращ фактор (GM-CSF). Тези фактори са от решаващо значение за набирането и активирането на неутрофилите, които играят ключова роля в имунния отговор и възпалението. Доказано е, че клетките KHM-5M притежават изключителна хемотактична активност - характеристика, която е потвърдена чрез in vitro експерименти, използващи кондиционирана среда от клетките и модифицирана техника на камерата на Бойдън.
Освен това клетките KHM-5M са трансплантирани на голи плъхове, при което е наблюдавана инфилтрация на неутрофили в и около трансплантираната туморна тъкан. Това откритие подчертава значението на KHM-5M като модел за изследване на взаимодействието между туморните клетки и имунната микросреда, особено по отношение на набирането и функцията на неутрофилите. Клетъчната линия служи и като ценен инструмент за изследване на молекулярните механизми, които са в основата на производството на цитокини при рака и последващото модифициране на патологичните характеристики. Чрез техники за клониране на ДНК бяха потвърдени хемотактичните активности, приписвани на IL-8 и GM-CSF, което затвърди клетъчната линия KHM-5M като значим ресурс за изследване на цитокинови взаимодействия между тумора и имунната система.
- Тъкан
- Щитовидната жлеза
- Заболяване
- Анапластичен карцином на щитовидната жлеза
- Място на метастазите
- Плеврален излив
- Синоними
- KHM/5M
- KHM5M
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Фибробласти
- Време за удвояване
- 27 часа
04Идентификатори
- Източник
- KHM-5M (каталожен номер на Cytion 305148)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_2975
05Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
07Дарител
- Възраст на донора
- 65 години
08Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да