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- Tessuto
- Tiroide
- Malattia
- Carcinoma anaplastico della ghiandola tiroidea
- Sito metastatico
- Versamento pleurico
- Sinonimi
- KHM/5M, KHM5M
Documenti
KHM-5M
Cell line · Codice prodotto 305148
The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...
Personalizzazione / Suggerimenti
- KHM-5MCell line€650.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare KHM-5M è un importante modello derivato da un paziente con carcinoma tiroideo indifferenziato complicato da neutrofilia e pleurite maligna. Questa linea cellulare è caratterizzata da una significativa produzione di fattori chemiotattici per i neutrofili, in particolare l'interleuchina umana 8 (IL-8) e il fattore stimolante le colonie di granulociti-macrofagi (GM-CSF). Questi fattori sono fondamentali per il reclutamento e l'attivazione dei neutrofili, che svolgono un ruolo centrale nella risposta immunitaria e nell'infiammazione. Le cellule KHM-5M hanno dimostrato di possedere un'estrema attività chemiotattica, caratteristica che è stata comprovata da esperimenti in vitro condotti utilizzando i mezzi condizionati delle cellule e la tecnica della camera di Boyden modificata.
Inoltre, le cellule KHM-5M sono state trapiantate in ratti nudi, dove è stata osservata l'infiltrazione di neutrofili all'interno e intorno al tessuto tumorale trapiantato. Questo risultato sottolinea la rilevanza di KHM-5M come modello per studiare le interazioni tra le cellule tumorali e il microambiente immunitario, in particolare in relazione al reclutamento e alla funzione dei neutrofili. La linea cellulare serve anche come strumento prezioso per studiare i meccanismi molecolari alla base della produzione di citochine nel cancro e la conseguente modifica delle caratteristiche patologiche. Attraverso tecniche di clonazione del DNA, sono state confermate le attività chemiotattiche attribuite a IL-8 e GM-CSF, consolidando la linea cellulare KHM-5M come una risorsa significativa per la ricerca sulle interazioni tumore-immunità guidate da citochine.
- Tessuto
- Tiroide
- Malattia
- Carcinoma anaplastico della ghiandola tiroidea
- Sito metastatico
- Versamento pleurico
- Sinonimi
- KHM/5M
- KHM5M
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Fibroblasti
- Tempo di raddoppio
- 27 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- KHM-5M (numero di catalogo Cytion 305148)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2975
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Età dei donatori
- 65 anni
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì