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KHM-5M
Tecido
Tiroide
Doença
Carcinoma anaplásico da glândula tiroide
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
KHM/5M, KHM5M

Documentos

KHM-5M

Cell line · Número do produto 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular KHM-5M é um modelo importante derivado de um doente com carcinoma indiferenciado da tiroide complicado por neutrofilia e pleurisia maligna. Esta linha celular é caracterizada pela sua produção significativa de factores quimiotácticos de neutrófilos, especificamente a interleucina 8 humana (IL-8) e o fator estimulador de colónias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF). Estes factores são cruciais para o recrutamento e a ativação de neutrófilos, que desempenham um papel fundamental na resposta imunitária e na inflamação. As células KHM-5M demonstraram possuir uma atividade quimiotáctica extrema, uma caraterística que foi comprovada através de experiências in vitro utilizando meios condicionados das células e a técnica da câmara de Boyden modificada.

Além disso, as células KHM-5M foram transplantadas para ratos nus, onde se observou a infiltração de neutrófilos dentro e à volta do tecido tumoral transplantado. Esta descoberta sublinha a relevância da KHM-5M como modelo para o estudo das interações entre as células tumorais e o microambiente imunitário, particularmente em relação ao recrutamento e à função dos neutrófilos. A linha celular também serve como uma ferramenta valiosa para investigar os mecanismos moleculares subjacentes à produção de citocinas no cancro e a subsequente modificação das caraterísticas patológicas. Através de técnicas de clonagem de ADN, as actividades quimiotácticas atribuídas à IL-8 e ao GM-CSF foram confirmadas, solidificando a linha celular KHM-5M como um recurso importante para a investigação das interações tumor-imune induzidas por citocinas.

Tecido
Tiroide
Doença
Carcinoma anaplásico da glândula tiroide
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Fibroblastos
Tempo de duplicação
27 horas

04Identificadores

Referência
KHM-5M (número de catálogo da Cytion 305148)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
65 anos