Pereiti prie turinio
Neuro-2a
Liga
Neuroblastoma
Sinonimai
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Dokumentai

Neuro-2a

Cell line · Prekės numeris 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Neuro-2a ląstelių linija, dažnai sutrumpintai vadinama N2A ląstelėmis, yra pelės neuroblastomos ląstelių linija, kilusi iš nervinio keteroskyros. Šios ląstelės pasižymi greitu dauginimusi ir gebėjimu tam tikromis sąlygomis diferencijuotis į neuronus panašiomis ląstelėmis, todėl yra vertingas modelis neurogenezei ir neuronų diferenciacijai tirti. Neuro-2a ląstelėms būdingos nervinėms ląstelėms arba neuroblastams, kurie yra visiškai diferencijuotų neuroninių ląstelių pirmtakai, būdingos savybės.

Viena iš svarbiausių pelių Neuro 2a ląstelių savybių - jų naudingumas tiriant diferenciacijos mechanizmus, ypač dopaminerginių neuronų kontekste. Šios ląstelės gali būti skatinamos išreikšti dopamino neuronams būdingus žymenis, įskaitant dopamino transporterį ir baltymus, susijusius su dopamino receptorių lokalizacija. Dėl to N2A ląstelių linija yra labai svarbi priemonė atliekant tyrimus, susijusius su normalia neuroendokrinine sistema ir sutrikimais, susijusiais su dopaminergine signalizacija.

N2A ląstelių linija taip pat leidžia suprasti įvairių genų ir baltymų vaidmenį neuronų funkcijoms ir vystymuisi. Pavyzdžiui, DNMT3A genas, žinomas dėl savo dalyvavimo DNR metilinimo procesuose, buvo tiriamas "Neuro2a" ląstelėse, siekiant suprasti jo poveikį neuronų ląstelėms ir neurologinio vystymosi procesams. Žmogaus skydliaukės hormonų receptoriaus raiška šiose ląstelėse leidžia mokslininkams tirti skydliaukės hormonų atsaką ir jo įtaką neurologiniam vystymuisi bei neuroblastomos ląstelių diferenciacijai į brandesnius neuronų fenotipus. Kita intensyvaus N2A ląstelių tyrimo sritis - baltymų kinazių signaliniai keliai, nes jie atlieka lemiamą vaidmenį tarpininkaujant įvairiems ląsteliniams procesams, įskaitant ląstelių augimą, diferenciaciją ir atsaką į ekstraląstelinius signalus.

Apibendrinant galima teigti, kad Neuro-2a (N2A) ląstelių linija, gauta iš pelių neuroblastomos, yra universalus neurogenezės, neuronų diferenciacijos ir dopaminerginių signalų tyrimo modelis, suteikiantis vertingų įžvalgų apie neurologinio vystymosi procesų ir neuroendokrininių sutrikimų molekulinius pagrindus.

Liga
Neuroblastoma
Sinonimai
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Ląstelių tipas
Neuronų ir ameboidinės kamieninės ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
Neuro-2a (Cytion katalogo numeris 400394)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
H-2a
Virusai
Ektromelijos virusas (pelių raupai): neigiamas
Atsparumas virusams
Poliovirusas 1
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Tubulinas, acetilcholinesterazė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
A/J