Gå til innholdet
Neuro-2a
Sykdom
Nevroblastom
Synonymer
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Dokumenter

Neuro-2a

Cell line · Produktnummer 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Neuro-2a-cellelinjen, ofte forkortet N2A-celler, er en nevroblastomcellelinje fra mus som stammer fra nervelisten. Disse cellene er kjent for sin raske spredning og evne til å differensiere til nevronlignende celler under visse betingelser, noe som gjør dem til en verdifull modell for studier av nevrogenese og nevronal differensiering. Neuro-2a-celler har egenskaper som er typiske for nerveceller eller nevroblaster, som er forstadier til fullt differensierte nevronceller.

En av de viktigste egenskapene til Neuro-2a-celler fra mus er at de kan brukes til å utforske differensieringsmekanismer, særlig i forbindelse med dopaminerge nevroner. Disse cellene kan induseres til å uttrykke markører som er karakteristiske for dopaminnevroner, inkludert dopamintransportøren og proteiner som er involvert i lokaliseringen av dopaminreseptorer. Dette gjør N2A-cellelinjen til et viktig verktøy for studier knyttet til det normale nevroendokrine systemet og forstyrrelser som er forbundet med dopaminerg signalering.

N2A-cellelinjen gir også innsikt i ulike geners og proteiners rolle i nevronal funksjon og utvikling. For eksempel har DNMT3A-genet, som er kjent for å være involvert i DNA-metyleringsprosesser, blitt studert i Neuro-2a-celler for å forstå dets innvirkning på nevronale celler og nevroutviklingsprosesser. Uttrykket av den humane skjoldbruskkjertelhormonreseptoren i disse cellene gjør det mulig for forskere å undersøke skjoldbruskkjertelhormonresponsen og dens innflytelse på nevroutvikling og differensieringen av nevroblastomceller til mer modne nevronale fenotyper. Proteinkinase-signalveier er et annet område som studeres intenst i N2A-celler, på grunn av deres kritiske rolle i medieringen av ulike cellulære prosesser, inkludert cellevekst, differensiering og respons på ekstracellulære signaler.

Neuro-2a (N2A)-cellelinjen, som er avledet fra musens nevroblastom, fungerer som en allsidig modell for studier av nevrogenese, nevronal differensiering og dopaminerg signalering, og gir verdifull innsikt i de molekylære forutsetningene for nevroutviklingsprosesser og nevroendokrine lidelser.

Sykdom
Nevroblastom
Synonymer
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Nevronale og amøboide stamceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Neuro-2a (Cytion katalognummer 400394)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
H-2a
Virus
Ektromelavirus (musekopper): negativ
Virusresistens
Poliovirus 1
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Tubulin, acetylkolinesterase

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
A/J