Siirry sisältöön
Neuro-2a
Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Asiakirjat

Neuro-2a

Cell line · Tuotenumero 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Neuro-2a-solulinja, josta käytetään usein lyhennettä N2A-solut, on hiiren neuroblastooma-solulinja, joka on peräisin hermorungosta. Nämä solut ovat tunnettuja nopeasta lisääntymisestään ja kyvystään erilaistua hermosolujen kaltaisiksi soluiksi tietyissä olosuhteissa, mikä tekee niistä arvokkaan mallin neurogeneesin ja hermosolujen erilaistumisen tutkimiseen. Neuro-2a-soluilla on hermosoluille eli neuroblasteille tyypillisiä ominaisuuksia, jotka ovat täysin erilaistuneiden hermosolujen esiasteita.

Yksi hiiren Neuro 2a -solujen tärkeimmistä ominaisuuksista on niiden käyttökelpoisuus erilaistumismekanismien tutkimisessa erityisesti dopaminergisten hermosolujen yhteydessä. Nämä solut voidaan saada ilmentämään dopamiinineuroneille tyypillisiä merkkiaineita, kuten dopamiinin kuljettajaa ja dopamiinireseptorien lokalisaatioon osallistuvia proteiineja. Tämä tekee N2A-solulinjasta olennaisen työkalun tutkimuksiin, jotka liittyvät normaaliin neuroendokriiniseen järjestelmään ja dopaminergiseen signalointiin liittyviin häiriöihin.

N2A-solulinja tarjoaa myös tietoa eri geenien ja proteiinien roolista hermosolujen toiminnassa ja kehityksessä. Esimerkiksi DNMT3A-geeniä, joka tunnetaan osallistumisestaan DNA-metylaatioprosesseihin, on tutkittu Neuro-2a-soluissa sen vaikutuksen ymmärtämiseksi hermosoluihin ja hermoston kehitysprosesseihin. Ihmisen kilpirauhashormonireseptorin ilmentyminen näissä soluissa antaa tutkijoille mahdollisuuden tutkia kilpirauhashormonivasteeseen ja sen vaikutusta hermoston kehitykseen ja neuroblastoomasolujen erilaistumiseen kypsemmiksi hermosolujen fenotyypeiksi. Proteiinikinaasien signalointireitit ovat toinen N2A-soluissa intensiivisesti tutkittu alue, koska niillä on kriittinen rooli erilaisten soluprosessien, kuten solujen kasvun, erilaistumisen ja solunulkoisiin signaaleihin reagoimisen, välittämisessä.

Yhteenvetona voidaan todeta, että hiiren neuroblastoomasta peräisin oleva Neuro-2a (N2A) -solulinja toimii monipuolisena mallina neurogeneesin, hermosolujen erilaistumisen ja dopaminergisen signaloinnin tutkimiseen, mikä antaa arvokasta tietoa neurologisten kehitysprosessien ja neuroendokriinisten häiriöiden molekulaarisista taustatekijöistä.

Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Neuronaaliset ja amoeboidiset kantasolut

04Tunnisteet

Lähdeviite
Neuro-2a (Cytionin luettelonumero 400394)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2a
Virukset
Ectromelia-virus (hiiren rokko): negatiivinen
Virusten kestävyys
Poliovirus 1
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Tubuliini, asetyylikoliiniesteraasi

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
1-2 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
A/J