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Neuro-2a
Disease
Neuroblastoma
Synonyms
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

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Neuro-2a

Cell line · Product number 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

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1

01General information

Description

A linhagem celular Neuro-2a, frequentemente abreviada como células N2A, é uma linhagem de neuroblastoma de camundongo derivada da crista neural. Essas células são conhecidas por sua rápida proliferação e capacidade de se diferenciarem em células semelhantes a neurônios sob certas condições, o que as torna um modelo valioso para o estudo da neurogênese e da diferenciação neuronal. As células Neuro-2a apresentam características típicas das células nervosas ou neuroblastos, que são precursores das células neuronais totalmente diferenciadas.

Uma das principais características das células Neuro-2a de camundongo é sua utilidade na exploração dos mecanismos de diferenciação, particularmente no contexto dos neurônios dopaminérgicos. Essas células podem ser induzidas a expressar marcadores característicos dos neurônios dopaminérgicos, incluindo o transportador de dopamina e proteínas envolvidas na localização dos receptores de dopamina. Isso torna a linhagem celular N2A uma ferramenta essencial para estudos relacionados ao sistema neuroendócrino normal e a distúrbios associados à sinalização dopaminérgica.

A linhagem celular N2A também fornece insights sobre o papel de vários genes e proteínas na função e no desenvolvimento neuronal. Por exemplo, o gene DNMT3A, conhecido por seu envolvimento nos processos de metilação do DNA, tem sido estudado em células Neuro-2a para compreender seu impacto nas células neuronais e nos processos de neurodesenvolvimento. A expressão do receptor do hormônio tireoidiano humano nessas células permite que os pesquisadores investiguem a resposta ao hormônio tireoidiano e sua influência no neurodesenvolvimento e na diferenciação de células de neuroblastoma em fenótipos neuronais mais maduros. As vias de sinalização da proteína quinase são outra área de intenso estudo nas células N2A, dado seu papel crítico na mediação de vários processos celulares, incluindo crescimento celular, diferenciação e resposta a sinais extracelulares.

Em resumo, a linhagem celular Neuro-2a (N2A), derivada do neuroblastoma de camundongo, serve como um modelo versátil para o estudo da neurogênese, da diferenciação neuronal e da sinalização dopaminérgica, fornecendo insights valiosos sobre os fundamentos moleculares dos processos de neurodesenvolvimento e dos distúrbios neuroendócrinos.

Disease
Neuroblastoma
Synonyms
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Células-tronco neuronais e amebóides

04Identifiers

Citation
Neuro-2a (número de catálogo da Cytion 400394)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2a
Viruses
Vírus da ectromelia (varíola do camundongo): negativo
Virus resistance
Poliovírus 1
Reverse transcriptase
Negativo
Products
Tubulina, acetilcolinesterase

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm²
Fluid renewal
1 a 2 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Breed / subspecies
A/J