Pāriet uz saturu
Neuro-2a
Slimība
Neuroblastoma
Sinonīmi
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Dokumenti

Neuro-2a

Cell line · Preces numurs 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Neuro-2a šūnu līnija, bieži saīsināti saukta par N2A šūnām, ir peļu neiroblastomas šūnu līnija, kas iegūta no nervu kores. Šīs šūnas ir pazīstamas ar savu straujo proliferāciju un spēju noteiktos apstākļos diferencēties par neironiem līdzīgām šūnām, padarot tās par vērtīgu modeli neirogēzes un neironu diferenciācijas pētījumiem. Neuro-2a šūnām piemīt raksturīgās īpašības, kas raksturīgas nervu šūnām jeb neiroblastiem, kas ir pilnībā diferencētu neironu šūnu priekšteči.

Viena no galvenajām peļu Neuro 2a šūnu īpašībām ir to lietderība diferenciācijas mehānismu izpētē, jo īpaši dopamīnerģisko neironu kontekstā. Šīm šūnām var izraisīt dopamīna neironiem raksturīgo marķieru, tostarp dopamīna transportiera un olbaltumvielu, kas saistītas ar dopamīna receptoru lokalizāciju, ekspresiju. Tas padara N2A šūnu līniju par būtisku instrumentu pētījumiem, kas saistīti ar normālu neiroendokrīno sistēmu un traucējumiem, kas saistīti ar dopamīnerģisko signalizāciju.

N2A šūnu līnija sniedz arī ieskatu par dažādu gēnu un proteīnu lomu neironu funkcijās un attīstībā. Piemēram, gēns DNMT3A, kas pazīstams ar savu iesaistīšanos DNS metilēšanas procesos, ir pētīts Neuro2a šūnās, lai izprastu tā ietekmi uz neironu šūnām un neiroloģiskās attīstības procesiem. Cilvēka vairogdziedzera hormonu receptora ekspresija šajās šūnās ļauj pētniekiem izpētīt vairogdziedzera hormonu reakciju un tās ietekmi uz neiroloģisko attīstību un neiroblastomas šūnu diferenciāciju par nobriedušākiem neironu fenotipiem. Vēl viena joma, kurā intensīvi tiek pētītas N2A šūnas, ir proteīnkināžu signalizācijas ceļi, ņemot vērā to izšķirošo lomu dažādu šūnu procesu, tostarp šūnu augšanas, diferenciācijas un reakcijas uz ārpusšūnu signāliem, nodrošināšanā.

Kopumā no peļu neiroblastomas atvasinātā šūnu līnija Neuro-2a (N2A) kalpo kā daudzpusīgs modelis neirogēzes, neironu diferenciācijas un dopamīnerģiskās signalizācijas izpētei, sniedzot vērtīgu ieskatu neiroloģiskās attīstības procesu un neiroendokrīno traucējumu molekulārajos pamatnosacījumos.

Slimība
Neuroblastoma
Sinonīmi
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Neironu un ameboīdu cilmes šūnas

04Identifikatori

Atsauce
Neuro-2a (Cytion kataloga numurs 400394)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2a
Vīrusi
Ektromēlijas vīruss (peļu bakas): negatīvs
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 1
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Tubulīns, acetilholīnesterāze

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
1 līdz 2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
A/J