Mine otse sisu juurde
Neuro-2a
Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Dokumendid

Neuro-2a

Cell line · Toote number 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Neuro-2a rakuliin, mida sageli lühendatakse N2A rakkudeks, on neuraalsest harjast saadud hiire neuroblastoomi rakuliin. Need rakud on tuntud oma kiire proliferatsiooni ja võime poolest diferentseeruda teatud tingimustel neuronilaadseks rakuks, mis teeb neist väärtusliku mudeli neurogeneesi ja neuronaalse diferentseerumise uurimiseks. Neuro-2a rakkudel on närvirakkudele ehk neuroblastidele iseloomulikud omadused, mis on täielikult diferentseerunud neuronaalsete rakkude eelkäijad.

Hiirte Neuro 2a rakkude üks peamisi omadusi on nende kasulikkus diferentseerumismehhanismide uurimisel, eriti dopamiinergiliste neuronite kontekstis. Neid rakke saab indutseerida dopamiini neuronitele iseloomulike markerite, sealhulgas dopamiini transporteri ja dopamiini retseptorite lokaliseerimisega seotud valkude ekspresseerimiseks. See muudab N2A rakuliini oluliseks vahendiks normaalse neuroendokriinsüsteemi ja dopamiinergilise signalisatsiooniga seotud häiretega seotud uuringute jaoks.

N2A rakuliin annab ka ülevaate erinevate geenide ja valkude rollist neuronaalses funktsioonis ja arengus. Näiteks on Neuro-2a rakkudes uuritud DNMT3A geeni, mis on tuntud oma osaluse poolest DNA metülatsiooniprotsessides, et mõista selle mõju neuronirakkudele ja neuroarenguprotsessidele. Inimese kilpnäärmehormooni retseptori ekspressioon nendes rakkudes võimaldab teadlastel uurida kilpnäärmehormoonile reageerimist ja selle mõju neuroarengule ning neuroblastoomirakkude diferentseerumist küpsemaks neuronaalseks fenotüübiks. Teine intensiivselt uuritav valdkond N2A rakkudes on valgukinaaside signaalirajad, arvestades nende kriitilist rolli erinevate rakuprotsesside, sealhulgas rakkude kasvu, diferentseerumise ja rakuvälisele signaalile reageerimise vahendamisel.

Kokkuvõtteks võib öelda, et neuroblastoomi neuro-2a (N2A) rakuliin, mis on saadud hiire neuroblastoomist, on mitmekülgne mudel neurogeneesi, neuronaalse diferentseerumise ja dopamiinergilise signaaliülekande uurimiseks, andes väärtuslikke teadmisi neuroarengu protsesside ja neuroendokriinsete häirete molekulaarsete aluste kohta.

Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Neuronaalsed ja amoeboidsed tüvirakud

04Tunnused

Viide
Neuro-2a (Cytioni katalooginumber 400394)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2a
Viirused
Ektromelia viirus (hiireviirus): negatiivne
Viirusresistentsus
Polioviirus 1
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Tubuliin, atsetüülkoliinesteraas

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
1 kuni 2 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
A/J