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Neuro-2a
Disease
神經母細胞瘤
Synonyms
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Documents

Neuro-2a

Cell line · Product number 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

Neuro-2a 細胞系(常簡稱為 N2A 細胞)是一種源自神經嵴的小鼠神經母細胞瘤細胞系。這些細胞以其快速增殖及在特定條件下能分化為類神經元細胞的能力而聞名,因此成為研究神經發生與神經元分化的寶貴模型。 Neuro-2a 細胞展現出神經細胞或神經母細胞的典型特徵,而神經母細胞正是完全分化神經元的前體細胞。

小鼠 Neuro-2a 細胞的一大關鍵特徵,在於其能用於探索分化機制,特別是在多巴胺能神經元方面。這些細胞可被誘導表達多巴胺能神經元的特徵性標記物,包括多巴胺轉運體以及參與多巴胺受體定位的蛋白質。 這使得 N2A 細胞系成為研究正常神經內分泌系統及與多巴胺能訊號傳導相關疾病不可或缺的工具。

N2A 細胞系亦有助於深入了解各種基因與蛋白質在神經元功能及發育中的作用。舉例而言,已知參與 DNA 甲基化過程的 DNMT3A 基因,便曾透過 Neuro-2a 細胞進行研究,以釐清其對神經元細胞及神經發育過程的影響。 這些細胞中人類甲狀腺激素受體的表達,使研究人員能夠探究甲狀腺激素的反應及其對神經發育,以及神經母細胞瘤細胞分化為更成熟神經元表型所產生的影響。 蛋白激酶訊號傳導途徑是 N2A 細胞的另一項重點研究領域,鑑於其在調控各種細胞過程(包括細胞生長、分化以及對細胞外訊號的反應)中扮演關鍵角色。

總而言之,源自小鼠神經母細胞瘤的 Neuro-2a (N2A) 細胞系,作為研究神經發生、神經元分化及多巴胺能訊號傳導的多功能模型,為神經發育過程及神經內分泌疾病的分子基礎提供了寶貴的見解。

Disease
神經母細胞瘤
Synonyms
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
神經幹細胞與阿米巴狀幹細胞

04Identifiers

Citation
Neuro-2a(Cytion 型號 400394)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0470

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2a
Viruses
短尾鼠痘病毒(鼠痘):陰性
Virus resistance
第1型小兒麻痺病毒
Reverse transcriptase
否
Products
微管蛋白、乙醯膽鹼酯酶

06Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 1 至 2 次
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
A/J