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Neuro-2a
病気
神経芽細胞腫
同義語
NEURO-2A, Neuro 2a, Neuro2a, Neuro2A, N-2a, N2a, N2A, Nb2a, NB2a

Neuro-2a

Cell line · 製品番号 400394

The Neuro-2a cell line, often abbreviated as N2A cells, is a mouse neuroblastoma cell line derived from the neural crest. These cells are known for their ...

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01概要

説明

N2A細胞と略されることの多いNeuro-2a細胞株は、神経堤由来のマウス神経芽細胞腫細胞株である。この細胞は、その急速な増殖と特定の条件下でニューロン様細胞に分化する能力で知られており、神経発生とニューロン分化を研究するための貴重なモデルとなっている。Neuro-2a細胞は、完全に分化した神経細胞の前駆体である神経細胞または神経芽細胞に典型的な特徴を示す。

マウスNeuro2a細胞の重要な特徴のひとつは、特にドーパミン作動性ニューロンにおける分化のメカニズムを探る上で有用であることである。これらの細胞は、ドーパミントランスポーターやドーパミン受容体の局在化に関与するタンパク質など、ドーパミンニューロンに特徴的なマーカーを発現するように誘導することができる。このため、N2A細胞株は、正常な神経内分泌系やドーパミン作動性シグナル伝達に関連する疾患に関する研究に不可欠なツールとなっている。

N2A細胞株はまた、神経細胞の機能と発生における様々な遺伝子やタンパク質の役割についての洞察をも与えてくれる。例えば、DNAメチル化過程への関与で知られるDNMT3A遺伝子は、神経細胞や神経発達過程への影響を理解するために、Neuro-2a細胞で研究されている。これらの細胞でヒト甲状腺ホルモン受容体を発現させることにより、研究者は甲状腺ホルモン応答と、神経発達や神経芽腫細胞のより成熟した神経細胞表現型への分化に対するその影響を調べることができる。プロテインキナーゼシグナル伝達経路は、細胞の増殖、分化、細胞外シグナルへの応答など、様々な細胞プロセスを媒介する上で重要な役割を担っていることから、N2A細胞におけるもう一つの重要な研究分野である。

まとめると、マウスの神経芽細胞腫に由来するNeuro-2a(N2A)細胞株は、神経発生、神経細胞分化、ドーパミン作動性シグナル伝達を研究するための多目的なモデルとして機能し、神経発達過程や神経内分泌疾患の分子的基盤に関する貴重な知見を提供している。

病気
神経芽細胞腫
同義語
  • NEURO-2A
  • Neuro 2a
  • Neuro2a
  • Neuro2A
  • N-2a
  • N2a
  • N2A
  • Nb2a
  • NB2a

02分類

生物
マウス
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

細胞の種類
神経幹細胞とアメーバ状幹細胞

04識別子

引用
Neuro-2a (Cytion カタログ番号 400394)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0470

05発現と感受性

抗原発現
H-2a
ウイルス
エクトロメリアウイルス(ネズミ痘):陰性
ウイルス耐性
ポリオウイルス1
逆転写酵素
ネガティブ
製品
チューブリン、アセチルコリンエステラーゼ

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週1~2回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
A/J