Pāriet uz saturu
SK-N-AS
Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
SKN-AS, SKNAS

Dokumenti

SK-N-AS

Cell line · Preces numurs 305272

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-N-AS šūnu līnija ir iegūta no cilvēka bērna neiroblastomas un tiek plaši izmantota neiroonkoloģiskajos pētījumos. Neiroblastoma ir vēža veids, kas rodas no nervu kores šūnām un galvenokārt skar bērnus. SK-N-AS šūnas ir vērtīgs modelis neiroblastomas bioloģijas un ārstēšanas izpētei, jo īpaši, lai izprastu molekulāros mehānismus, kas nosaka audzēja attīstību un progresēšanu. Šai šūnu līnijai ir raksturīgs relatīvi nediferencēts stāvoklis, kas padara to noderīgu neironu diferenciācijas un ļaundabīguma ceļu izpētei.

SK-N-AS šūnām piemīt adherents augšanas modelis un neiroblastiska morfoloģija. Tās ekspresē dažādus marķierus, kas saistīti ar nervu kores šūnām un neiroblastomu, tostarp neironiem specifisko enolāzi (NSE) un hromogranīnu A. Pētnieki izmanto SK-N-AS šūnas, lai pētītu ģenētiskās un epigenētiskās izmaiņas, kas saistītas ar neiroblastomu, piemēram, MYCN amplifikāciju un ALK mutācijas. Šīs šūnas izmanto arī augstas izšķirtspējas zāļu skrīningā un jaunu ķīmijterapeitisko līdzekļu un mērķterapiju pirmsklīniskajā testēšanā. Turklāt SK-N-AS šūnas tiek izmantotas, lai pētītu rezistences mehānismus pret parasto terapiju un izstrādātu stratēģijas, kā pārvarēt šādu rezistenci. SK-N-AS šūnu nozīme neiroblastomas pētniecībā uzsver to nozīmīgumu, lai uzlabotu mūsu izpratni par šo agresīvo bērnu vēzi un uzlabotu terapeitiskās pieejas slimajiem pacientiem.

Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
  • SKN-AS
  • SKNAS

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Šūnu tips
Neuroblasts
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
SK-N-AS (Cytion kataloga numurs 305272)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1700

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: NRAS, p.Gln61Lys (c.181C>A), heterozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
6 gadi
Etniskā piederība
Eiropas

10Informācija par produktu

Sastāva tabula