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SK-N-AS
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Neuroblastom
Metastasenherd
Knochenmark
Synonyme
SKN-AS, SKNAS

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SK-N-AS

Cell line · Artikelnummer 305272

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die SK-N-AS-Zelllinie stammt von einem Neuroblastom eines menschlichen Kindes und wird in der neuroonkologischen Forschung häufig verwendet. Das Neuroblastom ist eine Krebsart, die aus den Zellen der Neuralleiste entsteht und vorwiegend Kinder betrifft. SK-N-AS-Zellen sind ein wertvolles Modell für die Untersuchung der Biologie und Behandlung des Neuroblastoms, insbesondere für das Verständnis der molekularen Mechanismen, die die Tumorentwicklung und -progression vorantreiben. Diese Zelllinie zeichnet sich durch ihren relativ undifferenzierten Zustand aus, was sie für die Untersuchung der an der neuronalen Differenzierung und Bösartigkeit beteiligten Wege nützlich macht.

SK-N-AS-Zellen weisen ein adhärentes Wachstumsmuster auf und besitzen eine neuroblastische Morphologie. Sie exprimieren verschiedene Marker, die mit Neuronenstammzellen und Neuroblastomen assoziiert sind, darunter neuronen-spezifische Enolase (NSE) und Chromogranin A. Forscher nutzen SK-N-AS-Zellen, um die genetischen und epigenetischen Veränderungen zu untersuchen, die mit Neuroblastomen assoziiert sind, wie MYCN-Amplifikation und ALK-Mutationen. Diese Zellen werden auch im Hochdurchsatz-Wirkstoffscreening und in der präklinischen Prüfung neuer Chemotherapeutika und gezielter Therapien eingesetzt. Außerdem werden SK-N-AS-Zellen verwendet, um die Mechanismen der Resistenz gegen herkömmliche Therapien zu untersuchen und Strategien zur Überwindung dieser Resistenz zu entwickeln. Die Bedeutung der SK-N-AS-Zellen in der Neuroblastomforschung unterstreicht ihre Wichtigkeit für ein besseres Verständnis dieser aggressiven Krebserkrankung im Kindesalter und für die Verbesserung der therapeutischen Ansätze für betroffene Patienten.

Gewebe
Gehirn
Krankheit
Neuroblastom
Metastasenherd
Knochenmark
Synonyme
  • SKN-AS
  • SKNAS

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Zelltyp
Neuroblast
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-N-AS (Cytion-Katalognummer 305272)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1700

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: NRAS, p.Gln61Lys (c.181C>A), heterozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS, 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
6 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch

10Produktdetails

Zusammensetzungstabelle