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SK-N-AS
Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
SKN-AS, SKNAS

Documenti

SK-N-AS

Cell line · Codice prodotto 305272

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SK-N-AS deriva da un neuroblastoma di un bambino umano ed è ampiamente utilizzata nella ricerca neuro-oncologica. Il neuroblastoma è un tipo di cancro che nasce dalle cellule della cresta neurale e colpisce prevalentemente i bambini. Le cellule SK-N-AS rappresentano un modello prezioso per lo studio della biologia e del trattamento del neuroblastoma, in particolare per la comprensione dei meccanismi molecolari che guidano lo sviluppo e la progressione del tumore. Questa linea cellulare è caratterizzata da uno stato relativamente indifferenziato, che la rende utile per esaminare le vie coinvolte nel differenziamento neuronale e nella malignità.

Le cellule SK-N-AS presentano un modello di crescita aderente e una morfologia neuroblastica. Esprimono vari marcatori associati alle cellule della cresta neurale e al neuroblastoma, tra cui l'enolasi neurone-specifica (NSE) e la cromogranina A. I ricercatori utilizzano le cellule SK-N-AS per studiare i cambiamenti genetici ed epigenetici associati al neuroblastoma, come l'amplificazione di MYCN e le mutazioni ALK. Queste cellule sono anche impiegate per lo screening farmacologico ad alto rendimento e per la sperimentazione preclinica di nuovi agenti chemioterapici e terapie mirate. Inoltre, le cellule SK-N-AS sono utilizzate per studiare i meccanismi di resistenza alle terapie convenzionali e per sviluppare strategie per superare tale resistenza. La rilevanza delle cellule SK-N-AS nella ricerca sul neuroblastoma sottolinea la loro importanza nel far progredire la comprensione di questo aggressivo tumore infantile e nel migliorare gli approcci terapeutici per i pazienti affetti.

Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
  • SKN-AS
  • SKNAS

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tipo di cellula
Neuroblasto
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-N-AS (catalogo Cytion numero 305272)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1700

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: NRAS, p.Gln61Lys (c.181C>A), eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 1% NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
6 anni
Etnia
Europeo

10Dettagli sul prodotto

Tabella delle composizioni