Mine otse sisu juurde
SK-N-AS
Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
SKN-AS, SKNAS

Dokumendid

SK-N-AS

Cell line · Toote number 305272

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-N-AS rakuliin on saadud inimese lapse neuroblastoomist ja seda kasutatakse laialdaselt neuroonkoloogilistes uuringutes. Neuroblastoom on vähitüüp, mis tekib närviraku rakkudest ja esineb peamiselt lastel. SK-N-AS rakud on väärtuslik mudel neuroblastoomi bioloogia ja ravi uurimiseks, eelkõige kasvajate arengut ja progresseerumist juhtivate molekulaarmehhanismide mõistmiseks. Seda rakuliini iseloomustab suhteliselt diferentseerimata seisund, mis muudab selle kasulikuks neuronaalse diferentseerumise ja pahaloomulisuse uurimisel.

SK-N-AS rakud kasvavad adherentselt ja neil on neuroblastiline morfoloogia. Nad ekspresseerivad mitmesuguseid neuronaalsete rinde rakkude ja neuroblastoomiga seotud markereid, sealhulgas neuronispetsiifilist enolaasi (NSE) ja kromograniin A-d. Teadlased kasutavad SK-N-AS rakke neuroblastoomiga seotud geneetiliste ja epigeneetiliste muutuste, näiteks MYCN-i amplifikatsiooni ja ALK-mutatsioonide uurimiseks. Neid rakke kasutatakse ka ravimite kõrge läbilaskevõimega skriiningus ja uute kemoterapeutiliste ainete ja sihtotstarbeliste ravimeetodite prekliinilises testimises. Lisaks kasutatakse SK-N-AS rakke tavapäraste ravimeetodite suhtes resistentsuse mehhanismide uurimiseks ja sellise resistentsuse ületamise strateegiate väljatöötamiseks. SK-N-AS rakkude olulisus neuroblastoomi uurimisel rõhutab nende tähtsust selle agressiivse lastevähi mõistmise edendamisel ja haigestunud patsientide ravimeetodite parandamisel.

Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • SKN-AS
  • SKNAS

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Neuroblast
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
SK-N-AS (Cytioni katalooginumber 305272)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1700

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: Gln61Lys (c.181C>A), heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga, 1% NEAA-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
6 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa

10Toote üksikasjad

Koostis tabel