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SK-N-AS
Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
SKN-AS, SKNAS

Documentos

SK-N-AS

Cell line · Número do produto 305272

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular SK-N-AS é derivada de um neuroblastoma de uma criança humana e é amplamente utilizada na investigação neuro-oncológica. O neuroblastoma é um tipo de cancro que surge das células da crista neural e afecta predominantemente as crianças. As células SK-N-AS constituem um modelo valioso para o estudo da biologia e do tratamento do neuroblastoma, nomeadamente para a compreensão dos mecanismos moleculares que determinam o desenvolvimento e a progressão do tumor. Esta linha celular é caracterizada pelo seu estado relativamente indiferenciado, o que a torna útil para examinar as vias envolvidas na diferenciação neuronal e na malignidade.

As células SK-N-AS exibem um padrão de crescimento aderente e possuem uma morfologia neuroblástica. Exprimem vários marcadores associados às células da crista neural e ao neuroblastoma, incluindo a enolase específica dos neurónios (NSE) e a cromogranina A. Os investigadores utilizam as células SK-N-AS para investigar as alterações genéticas e epigenéticas associadas ao neuroblastoma, como a amplificação de MYCN e as mutações ALK. Estas células são também utilizadas no rastreio de medicamentos de elevado rendimento e em ensaios pré-clínicos de novos agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas. Além disso, as células SK-N-AS são utilizadas para estudar os mecanismos de resistência às terapias convencionais e para desenvolver estratégias para ultrapassar essa resistência. A relevância das células SK-N-AS na investigação do neuroblastoma sublinha a sua importância para o avanço da nossa compreensão deste agressivo cancro infantil e para a melhoria das abordagens terapêuticas para os doentes afectados.

Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
  • SKN-AS
  • SKNAS

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tipo de célula
Neuroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
SK-N-AS (número de catálogo Cytion 305272)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1700

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: NRAS, p.Gln61Lys (c.181C>A), heterozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS, 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
6 anos
Etnia
Europeu

10Detalhes do produto

Tabela de composição