İçeriğe atla
MDBK (NBL-1)
Doku
Böbrek
Eş anlamlılar
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

MDBK (NBL-1)

Cell line · Ürün numarası 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Madin-Darby Bovine Kidney hücrelerinin (NBL-1 olarak da bilinir) kısaltması olan MDBK hücreleri, görünüşte sağlıklı yetişkin Bos taurus, özellikle erkek bireylerin böbreklerinden elde edilen istisnai bir biyolojik kaynaktır. Bu hücreler yapışık olarak büyür ve epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.

MDBK hücrelerinin dikkat çekici uygulamalarından biri, konak hücre yüzey membranında Eimeria bovis türevi antijenlerin ekspresyonu üzerine in vitro çalışmaları kolaylaştırma yeteneklerinde yatmaktadır.
Ayrıca MDBK hücreleri, simian virüs beş ve insan parainfluenza virüsü tip 2 gibi paramiksovirüslerin V proteinleri tarafından sinyal dönüştürücü ve transkripsiyon aktivatörü 1 ve 2'nin (STAT1 ve STAT2) ubikitinasyonu ve degradasyonu etrafında odaklanan araştırmalarda kullanılmıştır.

Ortalama ikiye katlanma süresi 24 ila 35 saat arasında değişen MDBK hücreleri orta düzeyde bir çoğalma oranı sergiler. MDBK hücre hattının kuruluşu, S.H. Madin ve N.B. Darby'nin sağlıklı bir yetişkin öküzün böbreğinden başarıyla türettikleri 18 Şubat 1957'ye dayanmaktadır. O zamandan beri bu hücreler biyolojik araştırmalarda bir mihenk taşı haline gelmiş ve çeşitli bilimsel alanlarda çok sayıda atılım yapılmasını sağlamıştır.

MDBK hücrelerinin karyotip analizi, hipodiploid bir duruma işaret eden 51'lik bir modal kromozom sayısını ortaya koymaktadır. Hücre popülasyonu içinde, hipodiploid durum 2n = 60'lık bir kök kromozom sayısı olarak ortaya çıkar ve hücrelerin yaklaşık %5'inde 2S bileşeni görülür. Ayrıca, metasentrik, submetasentrik ve akro-telosentrik kromozomların bir kombinasyonunu içeren 11-14 marker kromozom tipik olarak mevcuttur. Özellikle, x kromozomu monozomik görünürken, HSR kromozomları veya DM'ler (çift dakika) gözlenmez.

MDBK hücreleri biyolojik araştırma alanında bir dizi uygulama sergilemektedir. Kullanım alanları 3D hücre kültürüne kadar uzanır ve bilim insanlarının ileri düzey çalışmalar için karmaşık doku benzeri yapıları yeniden oluşturmalarını sağlar. Ayrıca, MDBK hücreleri yüksek verimli taramada çok değerlidir ve çeşitli amaçlar için bileşiklerin veya ajanların hızlı ve verimli bir şekilde taranmasını kolaylaştırır. Ek olarak, bu hücreler, maddelerin canlı organizmalar üzerindeki güvenliğini ve potansiyel olumsuz etkilerini değerlendirmek için gerekli olan toksikoloji çalışmalarında çok önemli bir rol oynamaktadır.
Viral duyarlılıkla ilgili olarak, MDBK hücreleri Vesicular stomatitis Orsay (Indiana) virüsü, enfeksiyöz sığır rhinotracheitis virüsü, sığır rhinotracheitis virüsü, sığır parvovirüsü, sığır adenovirüsü 2 ve 3, sığır viral ishal virüsü 1 ve parainfluenza üç virüsü dahil olmak üzere çeşitli patojenlere karşı duyarlılık göstermektedir. Çok çeşitli virüslere karşı bu duyarlılık, MDBK hücrelerini viral patogenezin araştırılması ve antiviral stratejilerin değerlendirilmesi için çok değerli kılmaktadır.

Doku
Böbrek
Eş anlamlılar
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Sınıflandırma

Canlı
Sığır
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MDBK (NBL-1) (Cytion katalog numarası 600396)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
Hat test edilmiş ve bovine diarrhoea virüsü (BVD) içermediği gösterilmiştir.
Virüse karşı duyarlılık
Hücreler sığır ishal virüsü, veziküler stomatit (Indiana suşu), bulaşıcı sığır rhinotracheitis virüsü, sığır parvovirüsü, sığır adenovirüs I ve III ve parainfluenza virüs 3'e karşı duyarlıdır.
Virüs direnci
Poliovirüs 2
Ters transkriptaz
Negatif
Ürünler
Keratin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
Hızlı
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
Bos taurus
Bağışçının yaşı
Yetişkin