.jpg)
- Tissue
- כליה
- Synonyms
- MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney
Documents
MDBK (NBL-1)
Cell line · Product number 600396
MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי MDBK, קיצור של Madin-Darby Bovine Kidney cells (תאי כליה של בקר מדין-דארבי, הידועים גם כ-NBL-1), הם משאב ביולוגי יוצא דופן המופק מכליות של פרות בוגרות בריאות למראה, במיוחד זכרים. תאים אלה צומחים באופן הדוק ובעלי מורפולוגיה דמוית אפיתל.
אחד היישומים הבולטים של תאי MDBK הוא יכולתם להקל על מחקרים במבחנה על ביטוי אנטיגנים שמקורם ב-Eimeria bovis על קרום התא המארח.
בנוסף, תאי MDBK שימשו במחקרים שהתמקדו באוביקוויטינציה ובפירוק של מתווך האותות ומפעיל השעתוק 1 ו-2 (STAT1 ו-STAT2) על ידי חלבוני V של נגיפי פאראמיקסו, כגון נגיף קוף 5 ונגיף פאראינפלואנזה אנושי מסוג 2.עם זמן הכפלה ממוצע הנע בין 24 ל-35 שעות, תאי MDBK מציגים קצב התרבות בינוני. הקמת קו התאים MDBK מתוארכת ל-18 בפברואר 1957, כאשר S.H. Madin ו-N.B. Darby הצליחו להפיק אותו מכלייתו של פר בוגר ובריא. מאז, תאים אלה הפכו לאבן יסוד במחקר הביולוגי, ואפשרו פריצות דרך רבות בתחומים מדעיים שונים.
ניתוח הקריוטיפ של תאי MDBK מגלה מספר כרומוזומים מודאלי של 51, המעיד על מצב היפודיפלואידי. בתוך אוכלוסיית התאים, המצב ההיפודיפלואידי מתבטא במספר כרומוזומים גזעי של 2n = 60, עם רכיב 2S המופיע בכ-5% מהתאים. יתר על כן, בדרך כלל קיימים 11-14 כרומוזומים סמנים, הכוללים שילוב של כרומוזומים מטצנטריים, תת-מטצנטריים ואקרו-טלוצנטריים. יש לציין כי כרומוזום x נראה מונוזומי, בעוד שלא נצפו כרומוזומים HSR או DM (דקות כפולות).
לתאי MDBK יש מגוון יישומים בתחום המחקר הביולוגי. השימוש בהם משתרע על תרביות תאים תלת-ממדיות, המאפשרות למדענים לשחזר מבנים מורכבים הדומים לרקמות לצורך מחקרים מתקדמים. בנוסף, לתאי MDBK יש ערך רב בסינון תפוקה גבוהה, המאפשר סינון מהיר ויעיל של תרכובות או חומרים למטרות שונות. כמו כן, לתאים אלה תפקיד מכריע במחקרי טוקסיקולוגיה, החיוניים להערכת הבטיחות וההשפעות השליליות הפוטנציאליות של חומרים על אורגניזמים חיים.
בנוגע לרגישות ויראלית, תאי MDBK מפגינים רגישות למספר פתוגנים, כולל נגיף Vesicular stomatitis Orsay (Indiana), נגיף rinotracheitis מדבק בבקר, נגיף rinotracheitis בבקר, נגיף parvovirus בבקר, נגיף adenovirus 2 ו-3 בבקר, נגיף diarrhoea בבקר 1 ונגיף parainfluenza 3. רגישות זו למגוון רחב של נגיפים הופכת את תאי MDBK לבעלי ערך רב בחקר הפתוגנזה הנגיפית ובהערכת אסטרטגיות אנטי-ויראליות.- Tissue
- כליה
- Synonyms
- MDBK (NBL-1)
- NBL-1
- Madin-Darby Bovine Kidney
- Madin Darby Bovine Kidney
02Classification
- Organism
- Bovine
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- MDBK (NBL-1) (מספר קטלוגי Cytion 600396)
- NCBI TaxID
- 9913
- Cellosaurus
- CVCL_0421
05Expression and susceptibility
- Viruses
- הקו נבדק ונמצא נקי מנגיף השלשול הבקר (BVD).
- Virus susceptibility
- התאים רגישים לנגיף שלשול בקר, סטומטיטיס שלפוחיתית (זן אינדיאנה), נגיף רינוטראכיטיס מדבק בבקר, פרבווירוס בקר, אדנווירוס I ו-III בבקר, ונגיף פאראינפלואנזה 3.
- Virus resistance
- נגיף הפוליו 2
- Reverse transcriptase
- שלילי
- Products
- קרטין
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- כל 3 ימים
- Post-thaw recovery
- מהיר
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- Bos taurus
- Donor age
- מבוגר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Disclaimer
- התאים שלנו מיועדים אך ורק למטרות מחקר במעבדה במבחנה, ואינם מיועדים לשימוש קליני או אבחוני, ולא מיועדים לטיפול בבני אדם או לשימוש וטרינרי. על המשתמשים להקפיד על כל ההנחיות והתקנות החלות על טיפול ושימוש בתאים אלה בסביבת מחקר.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes