Skip to content
MDBK (NBL-1)
Tissue
כליה
Synonyms
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

Documents

MDBK (NBL-1)

Cell line · Product number 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי MDBK, קיצור של Madin-Darby Bovine Kidney cells (תאי כליה של בקר מדין-דארבי, הידועים גם כ-NBL-1), הם משאב ביולוגי יוצא דופן המופק מכליות של פרות בוגרות בריאות למראה, במיוחד זכרים. תאים אלה צומחים באופן הדוק ובעלי מורפולוגיה דמוית אפיתל.

אחד היישומים הבולטים של תאי MDBK הוא יכולתם להקל על מחקרים במבחנה על ביטוי אנטיגנים שמקורם ב-Eimeria bovis על קרום התא המארח.
בנוסף, תאי MDBK שימשו במחקרים שהתמקדו באוביקוויטינציה ובפירוק של מתווך האותות ומפעיל השעתוק 1 ו-2 (STAT1 ו-STAT2) על ידי חלבוני V של נגיפי פאראמיקסו, כגון נגיף קוף 5 ונגיף פאראינפלואנזה אנושי מסוג 2.

עם זמן הכפלה ממוצע הנע בין 24 ל-35 שעות, תאי MDBK מציגים קצב התרבות בינוני. הקמת קו התאים MDBK מתוארכת ל-18 בפברואר 1957, כאשר S.H. Madin ו-N.B. Darby הצליחו להפיק אותו מכלייתו של פר בוגר ובריא. מאז, תאים אלה הפכו לאבן יסוד במחקר הביולוגי, ואפשרו פריצות דרך רבות בתחומים מדעיים שונים.

ניתוח הקריוטיפ של תאי MDBK מגלה מספר כרומוזומים מודאלי של 51, המעיד על מצב היפודיפלואידי. בתוך אוכלוסיית התאים, המצב ההיפודיפלואידי מתבטא במספר כרומוזומים גזעי של 2n = 60, עם רכיב 2S המופיע בכ-5% מהתאים. יתר על כן, בדרך כלל קיימים 11-14 כרומוזומים סמנים, הכוללים שילוב של כרומוזומים מטצנטריים, תת-מטצנטריים ואקרו-טלוצנטריים. יש לציין כי כרומוזום x נראה מונוזומי, בעוד שלא נצפו כרומוזומים HSR או DM (דקות כפולות).

לתאי MDBK יש מגוון יישומים בתחום המחקר הביולוגי. השימוש בהם משתרע על תרביות תאים תלת-ממדיות, המאפשרות למדענים לשחזר מבנים מורכבים הדומים לרקמות לצורך מחקרים מתקדמים. בנוסף, לתאי MDBK יש ערך רב בסינון תפוקה גבוהה, המאפשר סינון מהיר ויעיל של תרכובות או חומרים למטרות שונות. כמו כן, לתאים אלה תפקיד מכריע במחקרי טוקסיקולוגיה, החיוניים להערכת הבטיחות וההשפעות השליליות הפוטנציאליות של חומרים על אורגניזמים חיים.
בנוגע לרגישות ויראלית, תאי MDBK מפגינים רגישות למספר פתוגנים, כולל נגיף Vesicular stomatitis Orsay (Indiana), נגיף rinotracheitis מדבק בבקר, נגיף rinotracheitis בבקר, נגיף parvovirus בבקר, נגיף adenovirus 2 ו-3 בבקר, נגיף diarrhoea בבקר 1 ונגיף parainfluenza 3. רגישות זו למגוון רחב של נגיפים הופכת את תאי MDBK לבעלי ערך רב בחקר הפתוגנזה הנגיפית ובהערכת אסטרטגיות אנטי-ויראליות.

Tissue
כליה
Synonyms
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Classification

Organism
Bovine
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
MDBK (NBL-1) (מספר קטלוגי Cytion 600396)
NCBI TaxID
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Expression and susceptibility

Viruses
הקו נבדק ונמצא נקי מנגיף השלשול הבקר (BVD).
Virus susceptibility
התאים רגישים לנגיף שלשול בקר, סטומטיטיס שלפוחיתית (זן אינדיאנה), נגיף רינוטראכיטיס מדבק בבקר, פרבווירוס בקר, אדנווירוס I ו-III בבקר, ונגיף פאראינפלואנזה 3.
Virus resistance
נגיף הפוליו 2
Reverse transcriptase
שלילי
Products
קרטין

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 ימים
Post-thaw recovery
מהיר
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
Bos taurus
Donor age
מבוגר