Gå direkte til indholdet
MDBK (NBL-1)
Væv
Nyre
Synonymer
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

Dokumenter

MDBK (NBL-1)

Cell line · Varenummer 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MDBK-celler, en forkortelse for Madin-Darby Bovine Kidney-celler (også kendt som NBL-1), er en enestående biologisk ressource, der stammer fra nyrerne fra tilsyneladende sunde voksne Bos taurus, især mandlige individer. Disse celler vokser vedhæftet og har en epitel-lignende morfologi.

En af de bemærkelsesværdige anvendelser af MDBK-celler ligger i deres evne til at lette in vitro-undersøgelser af ekspressionen af Eimeria bovis-afledte antigener på værtscellens overflademembran.
Derudover er MDBK-celler blevet anvendt i undersøgelser centreret omkring ubiquitinering og nedbrydning af signal transducer and activator of transcription 1 og 2 (STAT1 og STAT2) af V-proteinerne fra paramyxovirus, såsom simian virus five og human parainfluenza virus type 2.

Med en gennemsnitlig fordoblingstid på mellem 24 og 35 timer udviser MDBK-celler en moderat spredningshastighed. Etableringen af MDBK-cellelinjen går tilbage til 18. februar 1957, da S.H. Madin og N.B. Darby med succes udledte den fra nyren på en sund, voksen okse. Siden da er disse celler blevet en hjørnesten i den biologiske forskning og har muliggjort mange gennembrud inden for forskellige videnskabelige områder.

Karyotypeanalysen af MDBK-celler afslører et modalt kromosomtal på 51, hvilket indikerer en hypodiploid tilstand. Inden for cellepopulationen manifesterer den hypodiploide tilstand sig som et stamkromosomtal på 2n = 60, med en 2S-komponent, der forekommer i ca. 5 % af cellerne. Desuden er der typisk 11-14 markørkromosomer til stede, som består af en kombination af metacentriske, submetacentriske og akro-telocentriske kromosomer. Det er bemærkelsesværdigt, at x-kromosomet er monosomisk, mens der ikke ses nogen HSR-kromosomer eller DM'er (dobbeltminutter).

MDBK-celler har en lang række anvendelsesmuligheder inden for biologisk forskning. Deres anvendelighed strækker sig til 3D-cellekultur, hvilket gør det muligt for forskere at genskabe komplekse vævslignende strukturer til avancerede studier. Desuden er MDBK-celler uvurderlige i high-throughput-screening, hvor de letter den hurtige og effektive screening af forbindelser eller midler til forskellige formål. Derudover spiller disse celler en afgørende rolle i toksikologiske undersøgelser, som er vigtige for at evaluere stoffers sikkerhed og potentielle skadelige virkninger på levende organismer.
Med hensyn til viral modtagelighed udviser MDBK-celler modtagelighed over for flere patogener, herunder Vesicular stomatitis Orsay (Indiana)-virus, infektiøs bovin rhinotracheitisvirus, bovin rhinotracheitisvirus, bovin parvovirus, bovin adenovirus 2 og 3, bovin virusdiarrévirus 1 og parainfluenza tre-virus. Denne modtagelighed over for en lang række forskellige vira gør MDBK-celler uvurderlige til undersøgelse af viruspatogenese og evaluering af antivirale strategier.

Væv
Nyre
Synonymer
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Klassificering

Organisme
Kvæg
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDBK (NBL-1) (Cytion katalognummer 600396)
NCBI-skattenummer
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Linjen blev testet og viste sig at være fri for bovin diarrévirus (BVD).
Virusfølsomhed
Cellerne er modtagelige over for bovin diarrévirus, vesikulær stomatitis (Indiana-stamme), infektiøs bovin rhinotracheitisvirus, bovin parvovirus, bovin adenovirus I og III og parainfluenzavirus 3.
Virusresistens
Poliovirus 2
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Keratin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Bos taurus
Donorens alder
Voksen