MDBK (NBL-1)

MDBK-celler, en forkortelse for Madin-Darby Bovine Kidney-celler (også kjent som NBL-1), er en eksepsjonell biologisk ressurs som stammer fra nyrene til tilsynelatende friske voksne Bos taurus-okser, spesielt mannlige individer. Disse cellene vokser adherent og har en epitellignende morfologi.

En av de bemerkelsesverdige anvendelsene av MDBK-celler ligger i deres evne til å legge til rette for in vitro-studier av uttrykket av Eimeria bovis-avledede antigener på vertscellenes overflatemembran.
I tillegg har MDBK-celler blitt brukt i undersøkelser av ubiquitinering og nedbrytning av signal transducer and activator of transcription 1 og 2 (STAT1 og STAT2) av V-proteiner fra paramyxovirus, som simian virus five og humant parainfluensavirus type 2.

MDBK-cellene har en gjennomsnittlig fordoblingstid på mellom 24 og 35 timer, og har en moderat proliferasjonshastighet. MDBK-cellelinjen ble etablert 18. februar 1957, da S.H. Madin og N.B. Darby lyktes med å avlede den fra nyrene til en frisk, voksen okse. Siden den gang har disse cellene blitt en hjørnestein i biologisk forskning, og de har muliggjort en rekke gjennombrudd innen ulike vitenskapelige felt.

Karyotypeanalysen av MDBK-celler viser et modalt kromosomnummer på 51, noe som indikerer en hypodiploid tilstand. I cellepopulasjonen manifesterer den hypodiploide tilstanden seg som et stamlinjekromosomtall på 2n = 60, med en 2S-komponent som forekommer i omtrent 5 % av cellene. I tillegg er det vanligvis 11-14 markørkromosomer til stede, som består av en kombinasjon av metasentriske, submetasentriske og akro-telosentriske kromosomer. Spesielt x-kromosomet ser ut til å være monosomisk, mens ingen HSR-kromosomer eller DM-er (dobbeltminutter) er observert.

MDBK-celler har en rekke bruksområder innen biologisk forskning. De kan blant annet brukes i 3D-cellekulturer, noe som gjør det mulig for forskere å gjenskape komplekse vevslignende strukturer for avanserte studier. MDBK-celler er dessuten uvurderlige i screening med høy gjennomstrømning, noe som muliggjør rask og effektiv screening av forbindelser eller stoffer til ulike formål. I tillegg spiller disse cellene en avgjørende rolle i toksikologiske studier, som er avgjørende for å evaluere stoffers sikkerhet og potensielle skadevirkninger på levende organismer.
Når det gjelder mottakelighet for virus, viser MDBK-celler at de er mottakelige for flere patogener, blant annet Vesicular stomatitis Orsay (Indiana)-virus, infeksiøs bovin rhinotrakeittvirus, bovint rhinotrakeittvirus, bovint parvovirus, bovint adenovirus 2 og 3, bovint virusdiarévirus 1 og parainfluensa 3-virus. Denne mottakeligheten for et bredt spekter av virus gjør MDBK-celler uvurderlige for å undersøke viruspatogenese og evaluere antivirale strategier.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring