Pāriet uz saturu
MDBK (NBL-1)
Audums
Nieres
Sinonīmi
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

Dokumenti

MDBK (NBL-1)

Cell line · Preces numurs 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDBK šūnas, saīsinājums no Madin-Darby Bovine Kidney cells (pazīstamas arī kā NBL-1), ir izņēmuma bioloģiskais resurss, kas iegūts no acīmredzami veselu pieaugušu Bos taurus, īpaši vīriešu dzimuma indivīdu, nierēm. Šīs šūnas aug adherenti un tām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.

Viens no ievērojamiem MDBK šūnu lietojumiem ir to spēja atvieglot in vitro pētījumus par Eimeria bovis radīto antigēnu ekspresiju uz saimnieka šūnu virsmas membrānas.
Turklāt MDBK šūnas ir izmantotas pētījumos, kas saistīti ar 1. un 2. signāla transducera un transkripcijas aktivatora (STAT1 un STAT2) ubikvitināciju un degradāciju, ko veic paramiksovīrusu, piemēram, piektā simiāna vīrusa un 2. tipa cilvēka paragripas vīrusa, V proteīni.

MDBK šūnām, kuru vidējais dubultošanās laiks svārstās no 24 līdz 35 stundām, ir mērena proliferācija. MDBK šūnu līnija tika izveidota 1957. gada 18. februārī, kad S. H. Madins un N. B. Darbijs to veiksmīgi ieguva no veselīga pieauguša vērša nierēm. Kopš tā laika šīs šūnas ir kļuvušas par stūrakmeni bioloģiskajos pētījumos, ļaujot veikt daudzus atklājumus dažādās zinātnes jomās.

MDBK šūnu kariotipa analīzē atklāts 51 hromosomu modālais skaits, kas norāda uz hipodiploīdu stāvokli. Šūnu populācijā hipodiploīdais stāvoklis izpaužas kā cilmes hromosomu skaits 2n = 60, un 2S komponents sastopams aptuveni 5 % šūnu. Turklāt parasti ir 11-14 marķieru hromosomu, kas sastāv no metacentriskām, submetacentriskām un akrotelocentriskām hromosomām. Īpaši jāatzīmē, ka x hromosoma ir monosomiska, bet HSR hromosomas vai DM (dubultās minūtes) nav novērotas.

MDBK šūnām ir virkne pielietojumu bioloģisko pētījumu jomā. To lietderība attiecas arī uz 3D šūnu kultūrām, ļaujot zinātniekiem atjaunot sarežģītas audiem līdzīgas struktūras progresīviem pētījumiem. Turklāt MDBK šūnas ir nenovērtējamas augstas veiktspējas skrīningā, veicinot ātru un efektīvu savienojumu vai aģentu skrīningu dažādiem mērķiem. Turklāt šīm šūnām ir būtiska nozīme toksikoloģiskajos pētījumos, kas ir būtiski, lai novērtētu vielu drošību un iespējamo kaitīgo ietekmi uz dzīviem organismiem.
Attiecībā uz uzņēmību pret vīrusiem MDBK šūnas ir uzņēmīgas pret vairākiem patogēniem, tostarp pret Vesikulārā stomatīta Orsē (Indiana) vīrusu, liellopu infekciozā rinotraheīta vīrusu, liellopu rinotraheīta vīrusu, liellopu parvovīrusu, liellopu adenovīrusu 2 un 3, liellopu vīrusu diarrejas vīrusu 1 un paragripas vīrusu. Šī uzņēmība pret dažādiem vīrusiem padara MDBK šūnas nenovērtējamas vīrusu patoģenēzes izpētei un pretvīrusu stratēģiju novērtēšanai.

Audums
Nieres
Sinonīmi
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Klasifikācija

Organisms
Liellopu
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
MDBK (NBL-1) (Cytion kataloga numurs 600396)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Tika veikts tests un pierādīts, ka šī līnija nav inficēta ar govju caurejas vīrusu (BVD).
Jutība pret vīrusiem
Šūnas ir uzņēmīgas pret liellopu caurejas vīrusu, vezikulāro stomatītu (Indiānas celms), liellopu infekciozā rinotraheīta vīrusu, liellopu parvovīrusu, liellopu adenovīrusu I un III un 3. paragripas vīrusu.
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 2
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Keratīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Fast
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Bos taurus
Donora vecums
Pieaugušo