MDBK (NBL-1)

Buňky MDBK, zkratka pro buňky Madin-Darby Bovine Kidney (známé také jako NBL-1), jsou výjimečným biologickým zdrojem získaným z ledvin zjevně zdravých dospělých jedinců Bos taurus, konkrétně samců. Tyto buňky rostou adherentně a mají morfologii podobnou epitelu.

Jedno z pozoruhodných využití buněk MDBK spočívá v jejich schopnosti usnadnit in vitro studie exprese antigenů odvozených od Eimeria bovis na povrchové membráně hostitelských buněk.
Kromě toho byly buňky MDBK použity při výzkumech zaměřených na ubikvitinaci a degradaci signálních přenašečů a aktivátorů transkripce 1 a 2 (STAT1 a STAT2) proteiny V paramyxovirů, jako je simian virus 5 a lidský virus parainfluenzy typu 2. Tyto buňky byly také použity pro výzkumy, které se týkaly ubiquitinace a degradace proteinů V paramyxovirů, jako je simian virus 5 a virus lidské parainfluenzy typu 2.

Buňky MDBK s průměrnou dobou zdvojení v rozmezí 24 až 35 hodin vykazují střední míru proliferace. Vznik buněčné linie MDBK se datuje od 18. února 1957, kdy ji S. H. Madin a N. B. Darby úspěšně získali z ledviny zdravého dospělého vola. Od té doby se tyto buňky staly základním kamenem biologického výzkumu a umožnily řadu průlomových objevů v různých vědních oborech.

Analýza karyotypu buněk MDBK ukazuje modální počet chromozomů 51, což svědčí o hypodiploidním stavu. V rámci buněčné populace se hypodiploidní stav projevuje jako kmenové číslo chromozomů 2n = 60, přičemž složka 2S se vyskytuje přibližně u 5 % buněk. Kromě toho je obvykle přítomno 11-14 markerových chromozomů, které zahrnují kombinaci metacentrických, submetacentrických a akrotelocentrických chromozomů. Pozoruhodné je, že chromozom x se jeví jako monozomický, zatímco nejsou pozorovány žádné HSR chromozomy ani DM (dvojité minuty).

Buňky MDBK vykazují řadu aplikací v oblasti biologického výzkumu. Jejich užitečnost se rozšiřuje na 3D buněčné kultury, které vědcům umožňují vytvářet složité struktury podobné tkáním pro pokročilé studie. Kromě toho jsou buňky MDBK neocenitelné při vysokokapacitním screeningu, který usnadňuje rychlý a účinný screening sloučenin nebo látek pro různé účely. Kromě toho hrají tyto buňky zásadní roli v toxikologických studiích, které jsou nezbytné pro hodnocení bezpečnosti a potenciálních nežádoucích účinků látek na živé organismy.
Pokud jde o citlivost k virům, buňky MDBK vykazují vnímavost k několika patogenům, včetně viru vezikulární stomatitidy Orsay (Indiana), viru infekční bovinní rinotracheitidy, viru bovinní rinotracheitidy, bovinního parvoviru, bovinního adenoviru 2 a 3, viru bovinní virové diarrhoey 1 a viru parainfluenzy tři. Tato citlivost k různým virům činí buňky MDBK neocenitelnými pro zkoumání virové patogeneze a hodnocení antivirových strategií.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení